AOPI Dual-fluoresces telling is die toetstipe wat gebruik word vir die opsporing van selkonsentrasie en lewensvatbaarheid.Die oplossing is 'n kombinasie van akridien oranje (die groen-fluoresserende nukleïensuur vlek) en propidium jodied (die rooi-fluoresserende nukleïensuur vlek).Propidiumjodied (PI) is 'n membraanuitsluitingskleurstof wat slegs selle met gekompromitteerde membrane binnedring, terwyl akridienoranje in staat is om alle selle in 'n populasie binne te dring.Wanneer beide kleurstowwe in die kern teenwoordig is, veroorsaak propidiumjodied 'n vermindering in akridien oranje fluoressensie deur fluoressensie resonansie energie-oordrag (FRET).Gevolglik vlek kernselle met ongeskonde membrane fluoresserend groen en word as lewendig getel, terwyl kernselle met gekompromitteerde membrane slegs fluoresserend rooi kleur en as dood getel word wanneer die Countstar® FL-stelsel gebruik word.Nie-kernvormige materiaal soos rooibloedselle, bloedplaatjies en puin fluoresseer nie en word deur die Countstar® FL-sagteware geïgnoreer.
Proses van stamselterapie
Figuur 4 Monitering van lewensvatbaarheid en seltelling van mesenchimale stamselle (MSC's) vir die gebruik in selterapieë.
Bepaal MSC lewensvatbaarheid deur AO/PI en Trypan Blue toets
Figuur 2. A. Beeld van MSC gekleur deur AO/PI en Trypan Blue;2. Vergelyking van AO/PI en Trypan blou resultaat voor en na vervoer.
Die selbrekingsindeks verander, Trypan Blue-kleuring was nie so duidelik nie, dit is moeilik om die lewensvatbaarheid na vervoer te bepaal.Terwyl dubbelkleur-fluoressensie die kleur van lewende en dooie kernselle moontlik maak, genereer akkurate lewensvatbaarheid resultate selfs in die teenwoordigheid van puin, bloedplaatjies en rooibloedselle.
