Eksperimentele Protokol
Die sitotoksisiteit % word deur die vergelyking hieronder bereken.
Sitotoksisiteit % = (Lewendige tellings van beheer – Lewendige tellings van behandel) / Lewendige tellings van kontrole × 100
Deur die teikengewasselle te merk met nie-giftige, nie-radioaktiewe kalseïen AM of transfekteer met GFP, kan ons die doodmaak van die tumorselle deur CAR-T-selle monitor.Terwyl lewende teikenkankerselle gemerk sal word deur 'n groen kalseïen AM of GFP, kan die dooie selle nie die groen kleurstof behou nie.Hoechst 33342 word gebruik om alle selle (beide T-selle en tumorselle) te kleur, alternatiewelik kan teikentumorselle gekleur word met membraangebonde kalseïen AM, PI word gebruik om die dooie selle (beide T-selle en tumorselle) te kleur.Hierdie kleurstrategie maak voorsiening vir die onderskeid tussen verskillende selle.
E: T-verhouding afhanklike sitotoksisiteit van K562
Die voorbeeld Hoechst 33342, CFSE, PI fluoresserende beelde is die K562 teikenselle by t = 3 uur
Die gevolglike fluoresserende beelde het 'n toename in Hoechst+CFSE+PI+-teikenselle getoon namate E:T-verhouding toegeneem het
