የልቦለድ ኢሜጂንግ ሳይቶሜትን በመጠቀም ቀጥተኛ ትኩረት፣ አዋጭነት እና የፍኖታይፕ መለካት ግንድ ሕዋስ

ማጠቃለያ፡- Mesenchymal stem cells ከሜሶደርም ሊገለሉ የሚችሉ የፕሉሪፖተንት ግንድ ሴሎች ስብስብ ናቸው።በራሳቸው የመድገም እድሳት እና የባለብዙ አቅጣጫ ልዩነት ባህሪያት በመድሃኒት ውስጥ ለተለያዩ ህክምናዎች ከፍተኛ አቅም አላቸው.የሜሴንቺማል ግንድ ሴሎች ልዩ የሆነ የበሽታ መከላከያ ፍኖታይፕ እና በሽታ የመከላከል አቅም አላቸው።ስለዚህ ሜሴንቺማል ስቴም ሴሎች በስቴም ሴል ትራንስፕላንት ፣ በቲሹ ኢንጂነሪንግ እና በአካላት ሽግግር ውስጥ በሰፊው ጥቅም ላይ ይውላሉ።እና ከነዚህ አፕሊኬሽኖች ባሻገር፣ በተከታታይ መሰረታዊ እና ክሊኒካዊ የምርምር ሙከራዎች ውስጥ እንደ ዘር ህዋሶች በቲሹ ምህንድስና ውስጥ እንደ ጥሩ መሳሪያ ሆነው ያገለግላሉ።እስካሁን ድረስ የሜሴንቺማል ግንድ ሴሎችን ጥራት ለመቆጣጠር ሰፊ ተቀባይነት ያለው ዘዴ እና ደረጃ የለም.Countstar Rigel የእነዚህን ግንድ ህዋሶች በሚመረቱበት እና በሚለዩበት ጊዜ ትኩረትን ፣ አዋጭነትን እና የፍኖታይፕ ባህሪዎችን (እና ለውጦቻቸውን) መከታተል ይችላል።በተጨማሪም Countstar Rigel በጠቅላላው የሕዋስ ጥራት ክትትል ሂደት በቋሚው የብሩህ መስክ እና በፍሎረሰንስ ላይ የተመሰረቱ የምስል ቅጂዎች የቀረበ ተጨማሪ የስነ-ቅርጽ መረጃን የማግኘት ጥቅም አለው።Countstar Rigel ለስቴም ሴሎች የጥራት ቁጥጥር ፈጣን፣ ውስብስብ እና አስተማማኝ ዘዴ ያቀርባል።

ቁስአካላት እና መንገዶች:
Adipose-derived mesenchymal stem cells (AdMSCs) በፕሮፌሰር Nianmin Qi, AO/PI የማቅለም መፍትሄ (Shanghai RuiYu, CF002) ተሰጥቷቸዋል.ፀረ-ሰው፡ CD29፣ CD34፣ CD45፣ CD56፣ CD73፣ CD105፣ HLADR (BD Company)።
AdMSCs በ37℃፣ 5% CO2 እርጥበታማ ኢንኩቤተር ውስጥ ተሰርተዋል።ከመጠቀምዎ በፊት በትሪፕሲን መፈጨት።
የሲዲ ማርከር ማቅለሚያ ሂደት እንደ ፀረ እንግዳ አካላት መመሪያ ተከትሏል.
ከ Countstar Rigel ጋር የሲዲ ምልክት ማወቂያ፡-
1. የ PE ቻናልን ወደ PE fluorescence ምስል በማዘጋጀት የሲግናል-ቀለም አተገባበር ሂደት ተፈጥሯል.
2. ከእያንዳንዱ ክፍል 3 መስኮች ተይዘዋል.
3. ኢሜጂንግ እና የመነሻ ትንተና ከተጠናቀቁ በኋላ፣ የአዎንታዊ እና አሉታዊ ሽግግር መግቢያው (ሎግ በር) ቅንብር በFCS ሶፍትዌር ተዘጋጅቷል።

የስቴም ሴል ጥራት ቁጥጥር
የሚከተለው ምስል (ስእል 1) የአሰራር ሂደቱን ያሳያል የስቴም ሴል ሕክምና .

ምስል 1: ለስቴም ሴል ሕክምና ሂደት

ውጤቶች፡-
የአድኤምኤስሲዎችን ትኩረት፣ አዋጭነት፣ ዲያሜትር እና ውህደት መወሰን።
የአድኤምኤስሲዎች አዋጭነት በAO/PI ተወስኗል፣ ባለሁለት ቀለም አተገባበር ሂደት የተፈጠረው አረንጓዴ ቻናል እና ቀይ ቻናልን ወደ AO እና PI fluorescence ምስል በማዘጋጀት እና እንዲሁም ብሩህ መስክ ነው።የምሳሌ ምስሎች በስእል 2 ታይተዋል።

ምስል 2. የ AdMSC ዎች ከማጓጓዝ በፊት እና በኋላ ምስሎች.ሀ. ከማጓጓዝ በፊት;ተወካይ ምስል ይታያል.B. ከመጓጓዣ በኋላ;ተወካይ ምስል ይታያል.

የAdMSCs አዋጭነት ከትራንስፖርት በኋላ ከመጓጓዣ በፊት ከነበረው ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ ተቀይሯል።ከመጓጓዙ በፊት ያለው አዋጭነት 92% ነበር, ነገር ግን ከመጓጓዣ በኋላ ወደ 71% ቀንሷል.ውጤቱ በስእል 3 ታይቷል.

ምስል 3. የአድኤምኤስሲዎች አዋጭነት ውጤቶች (ከመጓጓዣ በፊት እና በኋላ)

ዲያሜትሩ እና ውህደቱ እንዲሁ በ Countstar Rigel ተወስኗል።የAdMSCs ዲያሜትር ከማጓጓዣ በፊት ከነበረው ጋር ሲወዳደር ከመጓጓዣ በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ተቀይሯል።ከመጓጓዙ በፊት የነበረው ዲያሜትር 19µm ነበር፣ ነገር ግን ከመጓጓዣ በኋላ ወደ 21µm አድጓል።ከመጓጓዣው በፊት የነበረው አጠቃላይ ድምር 20% ነበር, ነገር ግን ከመጓጓዣ በኋላ ወደ 25% ጨምሯል.በ Countstar Rigel ከተነሱት ምስሎች የAdMSCs ፍኖተ-ነገር ከመጓጓዣ በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ተለውጧል።ውጤቶቹ በስእል 4 ታይተዋል።

ምስል 4: ዲያሜትር እና ውህደት ውጤቶች.መ፡ የAdMSCs ተወካይ ምስሎች፣ የAdMSCs ፍኖተ-ዓይነት ከመጓጓዣ በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ተለውጠዋል።ለ፡ ከትራንስፖርት በፊት የነበረው ድምር 20% ቢሆንም ከትራንስፖርት በኋላ ወደ 25% አድጓል።ሐ፡ ከመጓጓዙ በፊት የነበረው ዲያሜትር 19µm ነበር፣ ነገር ግን ከመጓጓዣ በኋላ ወደ 21µm አድጓል።

በ Countstar Rigel የ AdMSC ን የበሽታ መከላከያዎችን ይወስኑ
የAdMSC ዎች የበሽታ ተከላካይ ሕዋሳት በ Countstar Rigel ተወስነዋል፣ AdMSCs እንደቅደም ተከተላቸው ከተለያዩ ፀረ እንግዳ አካላት (CD29፣ CD34፣ CD45፣ CD56፣ CD73፣ CD105፣ HLA-DR) ጋር ገብተዋል።አረንጓዴ ቻናልን ወደ PE fluorescence ምስል በማዘጋጀት የሲግናል-ቀለም አተገባበር ሂደት ተፈጥሯል እና ብሩህ መስክ።የ PE fluorescence ምልክትን ናሙና ለማድረግ የብሩህ የመስክ ምስል ማመሳከሪያ ክፍል እንደ ጭምብል ተተግብሯል።የሲዲ105 ውጤቶች ታይተዋል (ምስል 5).

ምስል 5፡ CD105 የAdMSCs ውጤቶች በCountstar Rigel ተወስነዋል።መ: በተለያዩ ናሙናዎች ውስጥ ያለው የሲዲ105 አዎንታዊ መቶኛ በFCS ኤክስፕረስ 5 ሲደመር ሶፍትዌር የቁጥር ትንተና።ለ: ከፍተኛ ጥራት ያላቸው ምስሎች ተጨማሪ የስነ-ቁምፊ መረጃን ያቀርባሉ.ሐ፡ በእያንዳንዱ ነጠላ ሕዋስ ድንክዬ የተረጋገጠ ውጤቶች፣ የFCS ሶፍትዌር መሳሪያዎች ህዋሶችን በተለያዩ የፕሮቲን አገላለጾቻቸው መሰረት ወደተለያዩ ቡድኖች ይከፋፍሏቸዋል።

ሌሎች ፀረ እንግዳ አካላት ውጤቶች በስእል 6 ታይተዋል።

ምስል 6፡ ሀ፡ የ ASC ዎች ተወካይ ምስል በተለመደው ስፒል-ቅርጽ ያለው ሞርፎሎጂ።በ OLYMPUS ማይክሮስኮፕ ተይዟል።ኦሪጅናል ማጉላት፣ (10x)።ለ፡ የASCs Adipogenic ልዩነት በ Ruthenium ቀይ ቀለም የተመሰከረው የማዕድን ቦታዎችን በማሳየት ነው።በ OLYMPUS ማይክሮስኮፕ ተይዟል።ኦሪጅናል ማጉላት (10x)።ሐ፡ የ ASCs የ Countstar FL ባህሪ።

ማጠቃለያ፡-
Countstar FL የእነዚህን ግንድ ህዋሶች በሚመረቱበት እና በሚለዩበት ጊዜ ትኩረትን፣ አዋጭነት እና የፍኖታይፕ ባህሪያትን (እና ለውጦቻቸውን) መከታተል ይችላል።FCS ኤክስፕረስ እያንዳንዱን የሲግናል ሴል ለመገምገም፣ ውሂቡን በምስሉ በኩል ለማረጋገጥ ተግባሩን ያቀርባል።ተጠቃሚው በ Countstar Rigel ውጤቶች ላይ በመመስረት ቀጣይ ሙከራዎችን ለማድረግ በራስ መተማመን ሊኖረው ይችላል።Countstar Rigel ለስቴም ሴሎች የጥራት ቁጥጥር ፈጣን፣ ውስብስብ እና አስተማማኝ ዘዴ ያቀርባል።