تحليل الكريات البيض في الدم الكامل هو اختبار روتيني في المختبر السريري أو بنك الدم.يعد تركيز الكريات البيض وقابليتها للحياة مؤشرًا حيويًا كمراقبة جودة تخزين الدم.بصرف النظر عن الكريات البيض ، يحتوي الدم الكامل على عدد كبير من الصفائح الدموية أو خلايا الدم الحمراء أو الحطام الخلوي ، مما يجعل من المستحيل تحليل الدم الكامل مباشرة تحت المجهر أو عداد خلايا المجال المضيء.تتضمن الطرق التقليدية لحساب خلايا الدم البيضاء عملية تحلل كرات الدم الحمراء ، وهي عملية تستغرق وقتًا طويلاً.
يعد عد AOPI Dual-fluoresces نوع الفحص المستخدم للكشف عن تركيز الخلية وقابليتها للحياة.المحلول عبارة عن مزيج من أكريدين البرتقالي (وصمة عار الحمض النووي الفلوري الأخضر) ويوديد البروبيديوم (بقعة الحمض النووي الفلورية الحمراء).يوديد البروبيديوم (PI) هو صبغة استبعاد غشاء لا تدخل إلا إلى الخلايا ذات الأغشية المعرضة للخطر ، في حين أن أكريدين البرتقالي قادر على اختراق جميع الخلايا في المجتمع.عند وجود كلتا الأصباغ في النواة ، يتسبب يوديد البروبيديوم في انخفاض التألق البرتقالي أكريدين عن طريق نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET).نتيجة لذلك ، تلطخ الخلايا المنواة ذات الأغشية السليمة باللون الأخضر الفلوري ويتم حسابها على أنها حية ، في حين أن الخلايا ذات النواة ذات الأغشية المخترقة تلطخ اللون الأحمر الفلوري فقط ويتم حسابها على أنها ميتة عند استخدام نظام ® Rigel.
Countstar Rigel حلاً مثاليًا للعديد من فحوصات توصيف الخلايا المعقدة ، مما يتيح تحليل خلايا الدم البيضاء في الدم الكامل بسرعة.
طريقة تجريبية:
1- خذ 20 ميكرولتر من عينة الدم وقم بتخفيف العينة في 180 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني.
2-إضافة 12 مايكرولتر من محلول AO / PI إلى عينة 12 مايكرولتر ، مختلطة بلطف مع ماصة ؛
3 اسحب 20 مايكرولتر من الخليط إلى شريحة الغرفة ؛
4. السماح للزنازين بالاستقرار في الغرفة لمدة دقيقة واحدة ؛
5. insect الشريحة في أداة Countstar FL ؛
6. اختر مقايسة "AO / PI Viability" ، ثم أدخل معرف العينة لهذه العينة.
7. حدد نسبة التخفيف ، نوع الخلية ، انقر فوق "تشغيل" لبدء الاختبار.
تحذير: AO و PI مادة مسرطنة محتملة.يوصى بأن يرتدي المشغل معدات الحماية الشخصية (PPE) لتجنب ملامسة الجلد والعينين مباشرة.
نتيجة:
1. صورة حقل مشرق للدم الكامل
في الصورة الميدانية الساطعة للدم الكامل ، لا يمكن رؤية خلايا الدم البيضاء بين خلايا الدم الحمراء.(شكل 1)
الشكل 1 الشكل 1 صورة حقل مشرقة للدم الكامل.
2. صورة مضان للدم الكامل
صبغة AO و PI كلاهما يصبغ الحمض النووي في نواة الخلية للخلايا.لذلك ، فإن الصفائح الدموية أو خلايا الدم الحمراء أو الحطام الخلوي غير قادرة على التأثير على تركيز الكريات البيض ونتائج الجدوى.يمكن تصور الكريات البيض الحية (الخضراء) والكريات البيض الميتة (الأحمر) بسهولة في الصور الفلورية.(الشكل 2)
الشكل 2 الشكل 2. الإسفار صور الدم الكامل.(أ).صورة قناة AO ؛(ب) صورة قناة PI ؛(ج) دمج صور قناة AO و PI.
3. تركيز وصلاحية الكريات البيض
يقوم برنامج FL تلقائيًا بحساب الخلايا المكونة من ثلاثة أقسام من الغرفة ويحسب متوسط قيمة إجمالي عدد خلايا WBC (1202) والتركيز (1.83 × 106 خلية / مل) والنسبة المئوية للبقاء (82.04٪).يمكن تصدير صور وبيانات الدم بالكامل بسهولة بتنسيق PDF أو صورة أو Excel لتحليل إضافي أو أرشفة البيانات.
الشكل 3 لقطة شاشة لبرنامج Countstar Rigel
