Узор, які змяшчае клеткі ў завісі, змешваецца з фарбавальнікам Трыпан-сіні, затым уцягваецца ў слайд камеры Countstar, прааналізаваны Countstar Automated Cell Counter.Заснаваныя на класічным прынцыпе падліку клетак трыпанавага блакітнага, прыборы Countstar аб'ядноўваюць перадавую тэхналогію аптычнай візуалізацыі, тэхналогію інтэлектуальнага распазнавання малюнкаў і магутныя праграмныя алгарытмы, каб не толькі забяспечыць канцэнтрацыю клетак і жыццяздольнасць, але і прадастаўляць інфармацыю аб канцэнтрацыі клетак, жыццяздольнасці, хуткасці агрэгацыі, круглясці , і размеркаванне дыяметра толькі за адзін прагон.
Агрэгаваны аналіз клетак
Малюнак 3 Падлік агрэгаваных клетак.
A. Малюнак клеткі ўзору;
B. Выява пробы клеткі з ідэнтыфікацыйным знакам праграмнага забеспячэння Countstar BioTech.(Зялёны круг: жывая клетка, жоўты круг: мёртвая клетка, чырвоны круг: агрэгаваная ячэйка).
C. Агрэгаваная гістаграма
Некаторыя першасныя клеткі або клеткі субкультуры схільныя да агрэгацыі пры дрэнным стане культуры або празмерным пераварванні, што выклікае вялікія цяжкасці пры падліку клетак.З дапамогай функцыі каліброўкі агрэгацыі Countstar можа рэалізаваць стымуляцыйны разлік агрэгацый, каб забяспечыць дакладны падлік клетак і атрымаць хуткасць агрэгацыі і гістаграму агрэгацыі, забяспечваючы тым самым аснову для эксперыментатараў для ацэнкі стану клетак.
Маніторынг росту клетак
Малюнак 4 Крывая росту клетак.
Крывая росту клетак з'яўляецца агульным метадам для вымярэння абсалютнага росту колькасці клетак, важным паказчыкам для вызначэння канцэнтрацыі клетак і адным з асноўных параметраў для культуры асноўных біялагічных уласцівасцяў клетак.Для таго, каб дакладна апісаць дынамічнае змяненне колькасці клетак на працягу ўсяго працэсу, тыповую крывую росту можна падзяліць на 4 часткі: інкубацыйны перыяд з павольным ростам;экспанентная фаза росту з вялікім ухілам, фаза плато і перыяд заняпаду.Крывую росту клетак можна атрымаць шляхам пабудовы графіка колькасці жывых клетак (10'000/мл) у залежнасці ад часу культывавання (h або d).
Вымярэнне канцэнтрацыі клетак і жыццяздольнасці
Малюнак 1. Выявы былі захопленыя Countstar BioTech, так як клеткі (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 і MDCK) у завісі фарбавалі Трыпанавым сінім адпаведна.
Countstar дастасавальна да клетак з дыяметрам ад 5-180 мкм, такіх як клетка млекакормячых, клетка насякомых і некаторыя планктоны.
Вымярэнне памеру ячэек
Малюнак 2 Вымярэнне памеру клетак CHO клетак да і пасля трансфекцыі плазмид.
А. Выявы завісі клетак СНО, афарбаваных трыпанавым сінім да і пасля трансфекцыі плазмид.
B. Параўнанне гістаграмы памеру клетак CHO да і пасля трансфекцыі плазмид.
Змена памеру клетак з'яўляецца ключавой асаблівасцю і звычайна вымяраецца пры даследаванні клетак.Звычайна гэта будзе вымярацца ў гэтых эксперыментах: трансфекцыя клетак, тэст на наркотыкі і аналізы актывацыі клетак.Countstar дае статыстычныя марфалагічныя дадзеныя, такія як памеры клетак, на працягу 20 секунд.
Аўтаматызаваны лічыльнік клетак Countstar можа даваць марфалагічныя дадзеныя клетак, у тым ліку гістаграмы кругавой формы і дыяметра.
