Пратакол эксперыменту
Цытатоксічнасць % разлічваецца па раўнанні ніжэй.
Цытатоксічнасць % = (Колькасць у жывым эфіры - Колькасць апрацаваных у жывым эфіры) / Колькасць жывых кантрольных паказчыкаў × 100
Пазначаючы опухолевые клеткі-мішэні нетаксічным, нерадыеактыўным кальцеінам AM або трансфікуючы GFP, мы можам кантраляваць забойства опухолевых клетак клеткамі CAR-T.У той час як жывыя ракавыя клеткі-мішэні будуць пазначаныя зялёным кальцеінам AM або GFP, мёртвыя клеткі не могуць захаваць зялёны фарбавальнік.Hoechst 33342 выкарыстоўваецца для афарбоўкі ўсіх клетак (як Т-клетак, так і опухолевых клетак), у якасці альтэрнатывы опухолевые клеткі-мішэні можна афарбаваць з дапамогай мембраназвязанага кальцеіна AM, PI выкарыстоўваецца для афарбоўкі мёртвых клетак (як Т-клетак, так і опухолевых клетак).Гэтая стратэгія афарбоўвання дазваляе адрозніваць розныя клеткі.
E: T Цытатаксічнасць K562, якая залежыць ад суадносін
Прыкладам флуоресцентных малюнкаў Hoechst 33342, CFSE, PI з'яўляюцца клеткі-мішэні K562 пры t = 3 гадзіны
Атрыманыя флуоресцентные выявы паказалі павелічэнне Hoechst+CFSE+PI+ клетак-мішэняў па меры павелічэння суадносін E:T