Проба, съдържаща клетки в суспензия, се смесва с трипаново синьо багрило, след което се изтегля в Countstar Chamber Slide, анализиран от Countstar Automated Cell Counter.Базирани на класическия принцип за броене на трипанови сини клетки, инструментите на Countstar интегрират усъвършенствана технология за оптични изображения, интелигентна технология за разпознаване на изображения и мощни софтуерни алгоритми, за да осигурят не само концентрацията и жизнеспособността на клетките, но също така предоставят информация за клетъчната концентрация, жизнеспособност, скорост на агрегация, закръгленост и разпределение на диаметъра само с един цикъл.
Агрегиран клетъчен анализ
Фигура 3 Преброяване на агрегирани клетки.
A. Изображение на клетъчна проба;
Б. Изображение на клетъчна проба с идентификационен знак от софтуера Countstar BioTech.(Зелен кръг: жива клетка, жълт кръг: мъртва клетка, червен кръг: агрегирана клетка).
C. Обобщена хистограма
Някои първични клетки или клетки от субкултура са склонни да се агрегират при лошо състояние на културата или прекомерно храносмилане, като по този начин причиняват големи затруднения при преброяването на клетките.С функцията за калибриране на агрегиране, Countstar може да реализира изчисление за стимулиране на агрегации, за да осигури точно преброяване на клетките и да получи скоростта на агрегация и хистограмата на агрегация, като по този начин предоставя база на експериментаторите да преценят състоянието на клетките.
Мониторинг на клетъчния растеж
Фигура 4 Крива на растежа на клетките.
Кривата на клетъчния растеж е често срещан метод за измерване на абсолютния растеж на броя на клетките, важен индикатор за определяне на клетъчната концентрация и един от основните параметри за културата на основните биологични свойства на клетките.За да се опише точно динамичната промяна в броя на клетките през целия процес, типичната крива на растеж може да бъде разделена на 4 части: инкубационен период с бавен растеж;експоненциална фаза на растеж с голям наклон, фаза на плато и период на спад.Кривата на клетъчния растеж може да бъде получена чрез начертаване на броя на живите клетки (10'000/mL) спрямо времето на култивиране (h или d).
Измерване на клетъчната концентрация и жизнеспособност
Фигура 1 Изображенията бяха заснети от Countstar BioTech като клетки (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 и MDCK) в суспензия бяха оцветени съответно с Trypan Blue.
Countstar е приложим за клетки с диаметър между 5-180um, като клетки на бозайници, клетки на насекоми и някои планктони.
Измерване на размера на клетката
Фигура 2 Измерване на размера на клетките на СНО клетки преди и след плазмидната трансфекция.
А. Изображения на суспензия на СНО клетки, оцветена с трипаново синьо преди и след плазмидната трансфекция.
Б. Сравнение на хистограмата на размера на СНО клетките преди и след плазмидната трансфекция.
Промяната на размера на клетката е ключова характеристика и обикновено се измерва при изследване на клетките.Обикновено ще се измерва в тези експерименти: клетъчна трансфекция, тест за наркотици и анализи за клетъчно активиране.Countstar предоставя статистически морфологични данни, като например размерите на клетките, в рамките на 20 секунди.
Автоматизираният брояч на клетките на Countstar може да даде морфологични данни на клетките, включително хистограми на кръговост и диаметър.
