সাসপেনশনে কোষ ধারণকারী একটি নমুনা ট্রাইপ্যান ব্লু ডাইয়ের সাথে মিশ্রিত হচ্ছে, তারপর কাউন্টস্টার অটোমেটেড সেল কাউন্টার দ্বারা বিশ্লেষণ করা কাউন্টস্টার চেম্বার স্লাইডে আঁকা হয়েছে।ক্লাসিক ট্রিপ্যান ব্লু সেল গণনা নীতির উপর ভিত্তি করে, কাউন্টস্টারের যন্ত্রগুলি উন্নত অপটিক্যাল ইমেজিং প্রযুক্তি, বুদ্ধিমান চিত্র সনাক্তকরণ প্রযুক্তি এবং শক্তিশালী সফ্টওয়্যার অ্যালগরিদমগুলিকে একীভূত করে যা শুধুমাত্র কোষের ঘনত্ব এবং কার্যকারিতা প্রদান করে না, বরং কোষের ঘনত্ব, কার্যক্ষমতা, একত্রিতকরণের হার, গোলাকারতার তথ্যও প্রদান করে। , এবং শুধুমাত্র একটি রান সঙ্গে ব্যাস বিতরণ.
সমষ্টিগত কোষ বিশ্লেষণ
চিত্র 3 একত্রিত কোষ গণনা।
ক. কোষের নমুনার ছবি;
B. কাউন্টস্টার বায়োটেক সফ্টওয়্যার দ্বারা শনাক্তকরণ চিহ্ন সহ সেল নমুনার ছবি৷(সবুজ বৃত্ত: জীবন্ত কোষ, হলুদ বৃত্ত: মৃত কোষ, লাল বৃত্ত: সমষ্টিগত কোষ)।
C. সমষ্টিগত হিস্টোগ্রাম
কিছু প্রাথমিক কোষ বা উপসংস্কৃতি কোষ একত্রিত হওয়ার প্রবণতা যখন দুর্বল সংস্কৃতির অবস্থা বা অত্যধিক হজম হয়, এইভাবে কোষ গণনা করতে বড় অসুবিধা হয়।একত্রীকরণ ক্রমাঙ্কন ফাংশনের সাথে, কাউন্টস্টার সঠিক কোষ গণনা নিশ্চিত করতে এবং একত্রিতকরণ হার এবং একত্রীকরণ হিস্টোগ্রাম পেতে সমষ্টির একটি উদ্দীপনা গণনা উপলব্ধি করতে পারে, এইভাবে কোষের অবস্থা বিচার করার জন্য পরীক্ষার্থীদের জন্য ভিত্তি প্রদান করে।
কোষ বৃদ্ধির নিরীক্ষণ
চিত্র 4 সেল গ্রো কার্ভ।
কোষের বৃদ্ধির বক্ররেখা হল কোষ সংখ্যার নিখুঁত বৃদ্ধি পরিমাপের একটি সাধারণ পদ্ধতি, কোষের ঘনত্ব নির্ধারণের জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ সূচক এবং কোষের মৌলিক জৈবিক বৈশিষ্ট্যগুলির সংস্কৃতির জন্য একটি মৌলিক পরামিতি।পুরো প্রক্রিয়া জুড়ে কোষের সংখ্যার গতিশীল পরিবর্তনকে সঠিকভাবে বর্ণনা করার জন্য, সাধারণ বৃদ্ধি বক্ররেখাকে 4টি ভাগে ভাগ করা যেতে পারে: ধীর বৃদ্ধির সাথে ইনকিউবেশন সময়কাল;বড় ঢাল, মালভূমি ফেজ এবং পতনের সময় সহ সূচকীয় বৃদ্ধির পর্যায়।জীবিত কোষের সংখ্যা (10'000/mL) কালচার সময়ের (h বা d) বিপরীতে প্লট করে কোষের বৃদ্ধি বক্ররেখা পাওয়া যেতে পারে।
কোষের ঘনত্ব এবং কার্যক্ষমতা পরিমাপ করা
চিত্র 1 চিত্রগুলি কাউন্টস্টার বায়োটেক দ্বারা ক্যাপচার করা হয়েছিল যেহেতু কোষগুলি (ভেরো, 3টি 3, 549, বি 16, সিএইচও, হেলা, এসএফ9, এবং এমডিসিকে) যথাক্রমে ট্রাইপ্যান ব্লু দ্বারা দাগযুক্ত হয়েছিল৷
কাউন্টস্টার 5-180um এর মধ্যে ব্যাসযুক্ত কোষের জন্য প্রযোজ্য, যেমন স্তন্যপায়ী কোষ, পোকা কোষ এবং কিছু প্লাঙ্কটন।
কোষের আকার পরিমাপ
চিত্র 2 প্লাজমিড ট্রান্সফেকশনের আগে এবং পরে CHO কোষের কোষের আকার পরিমাপ।
A. প্লাজমিড ট্রান্সফেকশনের আগে এবং পরে ট্রিপ্যান নীল দ্বারা দাগযুক্ত CHO কোষের সাসপেনশনের ছবি।
B. প্লাজমিড ট্রান্সফেকশনের আগে এবং পরে CHO কোষের আকারের হিস্টোগ্রামের তুলনা।
কোষের আকারের পরিবর্তন একটি মূল বৈশিষ্ট্য এবং সাধারণত কোষ গবেষণায় পরিমাপ করা হয়।সাধারণত এটি এই পরীক্ষাগুলিতে পরিমাপ করা হবে: কোষ স্থানান্তর, ড্রাগ পরীক্ষা এবং কোষ সক্রিয়করণ অ্যাসেস।কাউন্টস্টার 20 এর মধ্যে পরিসংখ্যানগত মরফোলজি ডেটা প্রদান করে, যেমন কোষের আকার।
কাউন্টস্টার স্বয়ংক্রিয় সেল কাউন্টার বৃত্তাকার এবং ব্যাস হিস্টোগ্রাম সহ কোষের আকারগত তথ্য দিতে পারে।
