পুরো রক্তে লিউকোসাইট বিশ্লেষণ করা ক্লিনিকাল ল্যাব বা ব্লাড ব্যাঙ্কে একটি নিয়মিত পরীক্ষা।রক্ত সঞ্চয়ের মান নিয়ন্ত্রণ হিসাবে লিউকোসাইটের ঘনত্ব এবং কার্যকারিতা গুরুত্বপূর্ণ সূচক।লিউকোসাইট ছাড়াও, পুরো রক্তে প্রচুর পরিমাণে প্লেটলেট, লোহিত রক্তকণিকা বা সেলুলার ধ্বংসাবশেষ থাকে, যা সরাসরি মাইক্রোস্কোপ বা উজ্জ্বল ফিল্ড সেল কাউন্টারের নীচে সম্পূর্ণ রক্ত বিশ্লেষণ করা অসম্ভব করে তোলে।শ্বেত রক্তকণিকা গণনা করার প্রচলিত পদ্ধতিতে আরবিসি লিসিস প্রক্রিয়া জড়িত, যা সময়সাপেক্ষ।
AOPI ডুয়াল-ফ্লুরোসেস গণনা হল কোষের ঘনত্ব এবং কার্যকারিতা সনাক্ত করার জন্য ব্যবহৃত অ্যাসের ধরন।সমাধান হল অ্যাক্রিডিন কমলা (সবুজ-ফ্লুরোসেন্ট নিউক্লিক অ্যাসিড দাগ) এবং প্রপিডিয়াম আয়োডাইড (লাল-ফ্লুরোসেন্ট নিউক্লিক অ্যাসিড দাগ) এর সংমিশ্রণ।প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড (PI) হল একটি মেমব্রেন এক্সক্লুশন ডাই যা শুধুমাত্র আপোসকৃত ঝিল্লির কোষে প্রবেশ করে, যখন অ্যাক্রিডিন কমলা জনসংখ্যার সমস্ত কোষে প্রবেশ করতে সক্ষম।যখন উভয় রঞ্জক নিউক্লিয়াসে উপস্থিত থাকে, তখন প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড ফ্লুরোসেন্স রেজোন্যান্স এনার্জি ট্রান্সফার (FRET) দ্বারা অ্যাক্রিডাইন কমলা প্রতিপ্রভা হ্রাস করে।ফলস্বরূপ, অক্ষত ঝিল্লি সহ নিউক্লিয়েটেড কোষগুলি ফ্লুরোসেন্ট সবুজ দাগ দেয় এবং লাইভ হিসাবে গণনা করা হয়, যেখানে আপোসকৃত ঝিল্লি সহ নিউক্লিয়েটেড কোষগুলি শুধুমাত্র ফ্লুরোসেন্ট লাল দাগ দেয় এবং Countstar® Rigel সিস্টেম ব্যবহার করার সময় মৃত হিসাবে গণনা করা হয়।
কাউন্টস্টার রিগেল হল অনেক জটিল কোষের জনসংখ্যার বৈশিষ্ট্য নির্ধারণের জন্য একটি আদর্শ সমাধান, যা পুরো রক্তের শ্বেত-রক্ত-কোষকে দ্রুত বিশ্লেষণ করতে সক্ষম করে।
পরীক্ষামূলক পদ্ধতি:
1. 20 μl রক্তের নমুনা নিন এবং নমুনাটি 180 μl PBS-এ পাতলা করুন।
2. 12µl AO/PI দ্রবণ 12µl নমুনায় যোগ করুন, আস্তে আস্তে পিপেটের সাথে মিশ্রিত করুন;
3. চেম্বার স্লাইডে 20µl মিশ্রণ আঁকুন;
4. কোষগুলিকে প্রায় 1 মিনিটের জন্য চেম্বারে বসতে দিন;
5. কাউন্টস্টার এফএল ইন্সট্রুমেন্টে স্লাইডটিকে পোকা দিন;
6. "AO/PI কার্যকারিতা" পরীক্ষা নির্বাচন করুন, তারপর এই নমুনার জন্য নমুনা আইডি লিখুন।
7. ডিলিউশন রেশিও, সেল টাইপ নির্বাচন করুন, পরীক্ষা শুরু করতে 'রান' ক্লিক করুন।
সতর্কতা: AO এবং PI একটি সম্ভাব্য কার্সিনোজেন।ত্বক এবং চোখের সাথে সরাসরি যোগাযোগ এড়াতে অপারেটরকে ব্যক্তিগত সুরক্ষামূলক সরঞ্জাম (PPE) পরার পরামর্শ দেওয়া হয়।
ফলাফল:
1. পুরো রক্তের উজ্জ্বল ক্ষেত্র চিত্র
পুরো রক্তের উজ্জ্বল ক্ষেত্রের ছবিতে, লোহিত রক্তকণিকার মধ্যে WBC-গুলি দৃশ্যমান নয়।(চিত্র 1)
চিত্র 1 পুরো রক্তের উজ্জ্বল ক্ষেত্রের চিত্র।
2. সম্পূর্ণ রক্তের ফ্লুরোসেন্স ইমেজ
AO এবং PI রঞ্জক উভয়ই কোষের কোষের নিউক্লিয়াসে দাগ ডিএনএ।অতএব, প্লেটলেট, লোহিত রক্তকণিকা, বা সেলুলার ধ্বংসাবশেষ লিউকোসাইটের ঘনত্ব এবং কার্যকারিতা ফলাফলকে প্রভাবিত করতে অক্ষম।লাইভ লিউকোসাইট (সবুজ) এবং মৃত লিউকোসাইট (লাল) সহজেই ফ্লুরোসেন্স চিত্রগুলিতে কল্পনা করা যায়।(চিত্র ২)
চিত্র 2 সম্পূর্ণ রক্তের ফ্লুরোসেন্স চিত্র।(ক)।এও চ্যানেলের ছবি;(খ) পিআই চ্যানেলের ছবি;(C) AO এবং PI চ্যানেলের ছবি একত্রিত করুন।
3. লিউকোসাইটের ঘনত্ব এবং কার্যকারিতা
কাউন্টস্টার এফএল সফ্টওয়্যারটি স্বয়ংক্রিয়ভাবে তিনটি চেম্বার বিভাগের কোষ গণনা করে এবং মোট WBC কোষ গণনা (1202), ঘনত্ব (1.83 x 106 কোষ/মিলি), এবং % কার্যকারিতা (82.04%) এর গড় মান গণনা করে।অতিরিক্ত বিশ্লেষণ বা ডেটা সংরক্ষণাগারের জন্য সম্পূর্ণ রক্তের ছবি এবং ডেটা সহজেই PDF, চিত্র বা এক্সেল হিসাবে রপ্তানি করা যেতে পারে।
চিত্র 3 কাউন্টস্টার রিগেল সফ্টওয়্যারের স্ক্রিনশট
