AOPI ডুয়াল-ফ্লুরোসেস গণনা হল কোষের ঘনত্ব এবং কার্যকারিতা সনাক্ত করার জন্য ব্যবহৃত অ্যাসের ধরন।সমাধান হল অ্যাক্রিডিন কমলা (সবুজ-ফ্লুরোসেন্ট নিউক্লিক অ্যাসিড দাগ) এবং প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড (লাল-ফ্লুরোসেন্ট নিউক্লিক অ্যাসিড দাগ) এর সংমিশ্রণ।প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড (PI) হল একটি মেমব্রেন এক্সক্লুশন ডাই যা শুধুমাত্র আপোসকৃত ঝিল্লির কোষে প্রবেশ করে, যখন অ্যাক্রিডিন কমলা জনসংখ্যার সমস্ত কোষে প্রবেশ করতে সক্ষম।যখন উভয় রঞ্জক নিউক্লিয়াসে উপস্থিত থাকে, তখন প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড ফ্লুরোসেন্স রেজোন্যান্স এনার্জি ট্রান্সফার (FRET) দ্বারা অ্যাক্রিডাইন কমলা প্রতিপ্রভা হ্রাস করে।ফলস্বরূপ, অক্ষত ঝিল্লি সহ নিউক্লিয়েটেড কোষগুলি ফ্লুরোসেন্ট সবুজ দাগ দেয় এবং লাইভ হিসাবে গণনা করা হয়, যেখানে আপোসকৃত ঝিল্লি সহ নিউক্লিয়েটেড কোষগুলি শুধুমাত্র ফ্লুরোসেন্ট লাল দাগ দেয় এবং Countstar® FL সিস্টেম ব্যবহার করার সময় মৃত হিসাবে গণনা করা হয়।লোহিত রক্তকণিকা, প্লেটলেট এবং ধ্বংসাবশেষের মতো অ-নিউক্লিয়েটেড উপাদান ফ্লুরোস হয় না এবং Countstar® FL সফ্টওয়্যার দ্বারা উপেক্ষা করা হয়।
স্টেম সেল থেরাপির প্রক্রিয়া
চিত্র 4 কোষ থেরাপিতে ব্যবহারের জন্য মেসেনকাইমাল স্টেম সেল (MSCs) এর কার্যকারিতা এবং কোষের সংখ্যা পর্যবেক্ষণ।
AO/PI এবং Trypan Blue asay দ্বারা MSC কার্যকারিতা নির্ধারণ করুন
চিত্র 2. A. AO/PI এবং Trypan Blue দ্বারা দাগযুক্ত MSC-এর ছবি;2. পরিবহনের আগে এবং পরে AO/PI এবং Trypan নীল ফলাফলের তুলনা।
সেল রিফ্র্যাক্টিভ ইনডেক্স পরিবর্তিত হয়, ট্রাইপ্যান ব্লু স্টেনিং এতটা স্পষ্ট ছিল না, পরিবহনের পরে কার্যকারিতা নির্ধারণ করা কঠিন।যদিও দ্বৈত রঙের ফ্লুরোসেন্স জীবিত এবং মৃত নিউক্লিয়েটেড কোষের দাগ দেওয়ার অনুমতি দেয়, এমনকি ধ্বংসাবশেষ, প্লেটলেট এবং লোহিত রক্তকণিকার উপস্থিতিতেও সঠিক কার্যক্ষমতার ফলাফল তৈরি করে।
