Mezenhimalne matične ćelije su podskup pluripotentnih matičnih ćelija koje se mogu izolovati iz mezoderma.Svojim karakteristikama obnavljanja samoreplikacije i višesmjerne diferencijacije posjeduju veliki potencijal za različite terapije u medicini.Mezenhimalne matične ćelije imaju jedinstven imuni fenotip i sposobnost imunološke regulacije.Stoga se mezenhimske matične ćelije već široko koriste u transplantaciji matičnih ćelija, tkivnom inženjeringu i transplantaciji organa.I pored ovih aplikacija, koriste se kao idealno oruđe u tkivnom inženjeringu kao ćelije za sejanje u nizu osnovnih i kliničkih istraživačkih eksperimenata.
Countstar Rigel može pratiti koncentraciju, vitalnost, analizu apoptoze i karakteristike fenotipa (i njihove promjene) tokom proizvodnje i diferencijacije ovih matičnih stanica.Countstar Rigel takođe ima prednost u dobijanju dodatnih morfoloških informacija, obezbeđenih stalnim svetlim poljem i snimcima slika zasnovanim na fluorescenciji tokom celog procesa praćenja kvaliteta ćelija.Countstar Rigel nudi brzu, sofisticiranu i pouzdanu metodu za kontrolu kvaliteta matičnih ćelija.
Praćenje održivosti MSC-a u regenerativnoj medicini
Slika 1 Praćenje vitalnosti i broja ćelija mezenhimalnih matičnih ćelija (MSC) za upotrebu u ćelijskoj terapiji
Matične ćelije su jedan od najperspektivnijih tretmana u regenerativnim ćelijskim terapijama.Od sakupljanja MSC do tretmana, važno je održati visoku održivost matičnih ćelija tokom svih koraka proizvodnje matičnih ćelija (Slika 1).Countstar-ov brojač matičnih ćelija prati održivost i koncentraciju matičnih ćelija kako bi igrao ključnu ulogu u kontroli kvaliteta.
Praćenje MSC morfoloških promjena nakon transporta
Prečnik i agregaciju je takođe odredio Countstar Rigel.Prečnik AdMSC-a je drastično promenjen nakon transporta u poređenju sa pre transporta.Pre transporta je prečnik bio 19 µm, ali se nakon transporta povećao na 21 µm.Agregacija prije transporta bila je 20%, ali se povećala na 25% nakon transporta.Sa slika koje je snimio Countstar Rigel, fenotip AdMSC-a je drastično promijenjen nakon transporta.Rezultati su prikazani na slici 3.
Identifikacija AdMSC-a u ćelijskom fenotipu
Trenutno su minimalne standardne procedure testiranja identifikacije za osiguranje kvaliteta praćenih MSC-a navedene u izjavi Međunarodnog društva za ćelijsku terapiju (ISCT), definiranoj već 2006. godine.
Brzo otkrivanje apoptoze u MSC sa FITC konjugiranim aneksinom-V i 7-ADD Uvod
Apoptoza ćelija može se detektovati sa FITC konjugovanim aneksinom-V i 7-ADD.PS se normalno nalazi samo na intracelularnom letku plazma membrane u zdravim ćelijama, ali tokom rane apoptoze, asimetrija membrane se gubi i PS se prenosi na spoljašnji list.
Slika 6 Detekcija apoptoze u MSC-ima od strane Countstar Rigela
A. Vizuelna inspekcija fluorescentne slike detekcije apoptoze u MSC-ima
B. Raspršene dijagrame apoptoze u MSC pomoću FCS expressa
C. Procenat ćelijske populacije na osnovu % normalnih, % apoptotičkih i % nekrotičnih/vrlo kasnih apoptotičkih ćelija.