Dual-fluorescence Viability (AO/PI), akridin narandžasta (AO) i propidijum jodid (PI) su nuklearne nukleinske boje i boje koje vežu kiselinu.AO može prodrijeti kroz membranu i mrtvih i živih ćelija i zamrljati jezgro, stvarajući zelenu fluorescenciju.Nasuprot tome, PI može prožimati samo dezintegrirajuće membrane mrtvih ćelija s jezgrom, stvarajući crvenu fluorescenciju.Tehnologija Countstar Rigel-a zasnovana na slikama isključuje ćelijske fragmente, ostatke i čestice artefakata, kao i male događaje kao što su trombociti, dajući vrlo precizan rezultat.Zaključno, Countstar Rigel sistem se može koristiti za svaki korak procesa proizvodnje ćelija.

Citotoksičnost posredovana T/NK ćelijama, U nedavno odobrenoj od strane FDA CAR-T ćelijskoj terapiji, genetski modifikovani T-limfociti se specifično vezuju za ciljane ćelije raka (T) i ubijaju ih.Countstar Rigel analizatori su u stanju da analiziraju ovaj kompletan proces citotoksičnosti posredovane T/NK ćelijama.

Studije citotoksičnosti se izvode označavanjem ciljnih ćelija raka sa CFSE ili njihovim transfekcijom sa GFP.Hoechst 33342 se može koristiti za bojenje svih ćelija (i T ćelija i tumorskih ćelija).Alternativno, ciljne tumorske ćelije mogu biti obojene CFSE.Propidijum jodid (PI) se koristi za bojenje mrtvih ćelija (i T ćelija i tumorskih ćelija).Koristeći ovu strategiju bojenja može se postići diskriminacija između različitih ćelija.

Efikasnost GFP transfekcije, U molekularnoj genetici, različitim modelnim organizmima i ćelijskoj biologiji, GFP gen se često koristi kao reporter za studije ekspresije.Trenutno naučnici obično koriste fluorescentne mikroskope ili protočne citometre za analizu efikasnosti transfekcije ćelija sisara.Ali rukovanje složenom tehnologijom naprednog protočnog citometra zahtijeva iskusnog i visoko kvalifikovanog operatera.Countstar Rigel omogućava korisnicima da lako i precizno izvrše test efikasnosti transfekcije bez troškova rada i održavanja povezanih sa tradicionalnom protočnom citometrijom.

Ćelijska apoptoza, Napredak ćelijske apoptoze se može pratiti upotrebom FITC konjugovanog Aneksina-V u kombinaciji sa 7-ADD.Ostaci fosfatidilserina (PS) se normalno nalaze na unutrašnjoj strani plazma membrane zdravih ćelija.Tokom rane apoptoze, integritet membrane se gubi i PS će biti premješten na vanjsku stranu ćelijske membrane.Aneksin V ima jak afinitet prema PS i stoga je idealan marker za rane apoptotičke ćelije.

Ćelijski ciklus, tokom ćelijske diobe, ćelije sadrže povećane količine DNK.Obilježeno PI, povećanje intenziteta fluorescencije je direktno proporcionalno akumulaciji DNK.Razlike u intenzitetu fluorescencije pojedinačnih ćelija su pokazatelji stvarnog statusa ćelijskog ciklusa MCF 7 ćelije su tretirane sa 4 μM nokodazola da bi se ove ćelije zaustavile u različitim fazama njihovog ćelijskog ciklusa.Slike svetlog polja dobijene tokom ovog testnog scenarija omogućavaju nam da identifikujemo svaku pojedinačnu ćeliju.PI fluorescentni kanal Countstar Rigel identifikuje DNK signale pojedinačnih ćelija čak i u agregatima.Detaljna analiza intenziteta fluorescencije može se izvesti pomoću FCS.

Fenotipizacija CD markera, Countstar Rigel modeli nude brži, jednostavniji i osjetljiviji pristup efikasnijoj imuno-baziranoj fenotipizaciji stanica.Sa slikama visoke rezolucije i moćnim integrisanim mogućnostima analize podataka, Countstar Rigel omogućava korisnicima da postignu dosledno pouzdane rezultate bez potrebe za opsežnim složenim podešavanjima kontrole i prilagodbama kompenzacije fluorescencije.

Diferencijacija ćelija indukovanog ubicom citokinom (CIK) pokazuje izuzetan kvalitet performansi Countstar Rigel analizatora u direktnom poređenju sa protočnim citometrima visoke klase.PBMC miša u kulturi su obojeni sa CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE i CD56-PE, i inducirani interleukinom (IL) 6. Zatim su analizirani istovremeno sa Countstar® Rigel i protočnom citometrijom.U ovom testu, CD3-CD4, CD3-CD8 i CD3-CD56 podijeljeni su u tri grupe, kako bi se odredio udio različitih subpopulacija ćelija.

Detekcija degenerisanih ćelija imunofluorescencijom, monoklonska antitela koja proizvode ćelijske linije će izgubiti neke pozitivne klonove tokom ćelijske proliferacije i prolaska usled degradacije ili genetskih mutacija.Veći gubitak će značajno uticati na produktivnost proizvodnog procesa.Praćenje razgradnje igra važnu ulogu u kontroli procesa kako bi se prinos antitijela pomaknuo na optimalno.

Većina antitijela proizvedenih u industriji BioPharma može se otkriti imunofluorescentnim označavanjem i kvantitativno analizirati pomoću serije Countstar Rigel.Slike svijetlog polja i kanala fluorescencije ispod jasno pokazuju one klonove koji su izgubili svojstvo da proizvode željena antitijela.Detaljnija analiza sa softverom DeNovo FCS Express Image potvrđuje da 86,35 % svih ćelija eksprimira imunoglobuline, a samo 3,34 % je jasno negativno.

Trypan (plavo napisano velikim slovom B) Brojanje ćelija, bojanje Trypan plavom se i dalje koristi u većini laboratorija za kulturu ćelija.

Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp se može instalirati na sve Countstar Rigel modele.Naši zaštićeni algoritmi za prepoznavanje slika analiziraju više od 20 parametara kako bi klasifikovali svaki otkriveni objekat.

Skladištenje u ćelijskoj liniji QC, U skladištu ćelija, sofisticirani koncept upravljanja kvalitetom osigurava siguran, efikasan nadzor svih ćelijskih proizvoda.Ovo garantuje stabilan kvalitet ćelija kriokonzerviranih, krio-konzerviranih za eksperimente, razvoj procesa i proizvodnju.

Countstar Rigel dobija slike visoke rezolucije, analizirajući različite morfološke karakteristike ćelijskih objekata kao što su prečnik, oblik i tendencija agregacije.Slike različitih koraka procesa mogu se lako uporediti jedna s drugom.Tako se varijacije u obliku i agregaciji mogu lako otkriti, izbjegavanjem subjektivnih ljudskih mjerenja.Baza podataka Countstar Rigel ima sofisticirani sistem upravljanja za skladištenje i preuzimanje slika i podataka.