Karakteristike proizvoda
Inovativna tehnologija optičkog množenja
Jedinstvena tehnologija zumiranja omogućava korisnicima da analiziraju ćelije u širokom rasponu prečnika
Kada koristi predloške BioApp sa svijetlim poljem u Countstar Miri, nova tehnologija zumiranja omogućava operateru da precizno identifikuje ćelijske objekte u rasponu prečnika od 1,0 µm do 180,0 µm.Dobijene slike prikazuju čak i detalje pojedinačnih ćelija.Ovo proširuje raspon primjena čak i na ćelijske objekte, koji se u prošlosti nisu mogli precizno analizirati.
Primjeri tipičnih ćelijskih linija u korelaciji sa selektivnim uvećanjima 5x, 6,6x i 8x |
Uvećanje Opseg prečnika | 5x | 6,6x | 8x |
>10µm | 5-10 µm | 1-5 µm |
Brojanje | ✓ | ✓ | ✓ |
Vabilnost | ✓ | ✓ | ✓ |
Tip ćelije | - MCF7
- HEK293
- CHO
- MSC
- RAW264.7
| - Immune Cell
- Pivski kvasac
- Embrionalne ćelije zebrice
| - Pichia Pastoris
- Chlorella vulgaris (FACHB-8)
- Escherichia
|
Progresivni algoritmi za analizu slike zasnovani na AI
Countstar Mira FL koristi prednosti umjetne inteligencije za razvoj algoritama za samoučenje.Oni su u stanju da identifikuju i analiziraju više karakteristika ćelija.Integracija parametara oblika ćelije omogućava vrlo preciznu i ponovljivu analizu statusa ćelijskog ciklusa i/ili daje podatke o korelaciji između promjene morfologije ćelije, formiranja klastera ćelija (agregata, malih sferoida) i uslova koji utiču.
Rezultati označavanja mezenhimalnih matičnih ćelija nepravilnog oblika (MSC; 5x uvećanje) u proliferirajućoj kulturi
- Zeleni krugovi označavaju žive ćelije
- Crveni krugovi označavaju mrtve ćelije
- Bijeli krugovi agregiranih ćelija
RAW264.7 ćelijska linija je mala i lako se skuplja.Countstar AI algoritam može identificirati ćelije u nakupinama i prebrojati
- Zeleni krugovi označavaju žive ćelije
- Crveni krugovi označavaju mrtve ćelije
- Bijeli krugovi agregiranih ćelija
Neujednačena veličina embrionalnih ćelija zebrice (6,6X uvećanje
- Zeleni krugovi označavaju žive ćelije
- Crveni krugovi označavaju mrtve ćelije
- Bijeli krugovi agregiranih ćelija
Intuitivni dizajn grafičkog korisničkog interfejsa (GUI).
Jasno strukturirani GUI omogućava efikasno i udobno izvođenje eksperimenta
- Opsežna biblioteka sa unapred podešenim tipovima ćelija i BioApps (protokoli šablona za analizu).Samo jedan klik na BioApp i test može početi.
- GUI prilagođen korisniku olakšava prebacivanje između različitih opcija menija i garantuje udobno iskustvo testiranja
- Jasni strukturirani moduli menija podržavaju korisnika u svakodnevnoj rutini testiranja
Odaberite BioApp, unesite ID uzorka i pokrenite analizu
128 GB internog kapaciteta za pohranu podataka, dovoljno za pohranu pribl.50.000 rezultata analize u Countstar (R) Mira.Za brzi pristup, željeni podaci se mogu odabrati različitim opcijama pretraživanja.
Korisna funkcija za uštedu vremena je kalkulator razrjeđenja koji se može preuzeti.On će isporučiti točne količine razblaživača i originalnog uzorka ćelija, nakon što se unese konačna koncentracija ćelija i ciljni volumen.Ovo čini prolaz ćelija u njihove subkulture ugodnim.
Višestruke funkcije aplikacije
Karakteristike analize Countstar Mira podržavaju korisnika u razumijevanju dinamičkih promjena unutar ćelijske kulture i pomažu u optimizaciji uslova njihovog rasta.
Napredni softver za prepoznavanje slika zasnovan na veštačkoj inteligenciji Countstar Mira je sposoban da isporuči više parametara.Pored standardnih rezultata koncentracije ćelije i statusa vitalnosti, distribucija veličine ćelije, moguće formiranje klastera, relativni intenzitet fluorescencije svake pojedinačne ćelije, oblik krivulje rasta i njihov vanjski faktor morfologije važni su parametri za procjenu stvarne stanje ćelijske kulture.Automatski generisani grafikoni krivulja rasta, distribucije dijametra i histograma intenziteta fluorescencije, analiza pojedinačnih ćelija unutar agregata i određivanje parametra kompaktnosti ćelije olakšavaju korisniku da bolje razumije dinamičke procese unutar ispitivane ćelijske kulture od početka do završetka procesa.
Histogram
Histogram distribucije relativnog intenziteta fluorescencije (RFI).
Histogram raspodjele promjera
Kriva rasta
Test slike i rezultati
Dijagram krive rasta
Primjena proizvoda
AO/PI testovi gustine i vitalnosti ćelija dvostruke fluorescencije
Metoda dvostruke fluorescencije AO/PI bojenja zasniva se na principu da se obje boje, akridin narandžasta (AO) i propidijum jodid (PI), interkaliraju između nukleinskih kiselina hromozoma u jezgru ćelije.Dok je AO sposoban da prodre kroz netaknute membrane jezgra u bilo kojem trenutku i oboji DNK, PI može proći samo ugroženu membranu jezgra umiruće (mrtve) ćelije.Akumulirani AO u ćelijskom jezgru emituje zeleno svjetlo na maksimalno 525 nm, ako je pobuđen na 480 nm, PI šalje crveno svjetlo sa svojom amplitudom na 615 nm, kada je pobuđen na 525 nm.Efekat FRET (Foerster Resonance Energy Transfer) garantuje da se emitovani signal AO na 525nm apsorbuje u prisustvu PI boje kako bi se izbegla dvostruka emisija svetlosti i prelivanje.Ova specijalna kombinacija boja AO/PI omogućava filtriranje ćelija koje sadrže jezgro u prisustvu akariona kao što su eritrociti.
Podaci Countstar Mira FL pokazali su dobru linearnost za gradijent razrjeđenja ćelija HEK293
Analiza efikasnosti GFP/RFP transfekcije
Efikasnost transfekcije je važan indeks u razvoju i optimizaciji ćelijskih linija, u podešavanju virusnih vektora i za praćenje prinosa proizvoda u Biopharma procesima.Postao je najčešće uspostavljeni test za brzo i pouzdano određivanje sadržaja ciljnog proteina unutar ćelije.U različitim pristupima genske terapije, on je nezamjenjiv alat za kontrolu efikasnosti transfekcije željene genetske modifikacije.
Countstar Mira ne samo da daje precizne i tačne rezultate, u poređenju sa protočnom citometrijom, osim toga, analizator pruža slike kao dokaz dokaza.Osim toga, značajno pojednostavljuje i ubrzava analizu kako bi se pojednostavio razvoj razvojnog i proizvodnog procesa.
Serija slika, koju je nabavio Countstar(R) Mira, pokazuje povećanje nivoa efikasnosti transfekcije (s lijeva na desno) genetski modificiranih ćelija (HEK 293 ćelijska linija; ekspresija GFP-a u različitim koncentracijama)
Rezultati uporednih mjerenja, izvršenih sa B/C CytoFLEX-om, koji potvrđuju podatke o efikasnosti GFP transfekcije modificiranih ćelija HEK 293, analizirane u Countstar Mira
Široko prihvaćena analiza održivosti Trypan Blue
Test diskriminacije održivosti Trypan Blue je još uvijek jedna od najčešće korištenih i najpouzdanijih metoda za određivanje broja (umirućih) mrtvih stanica unutar suspenzije stanične kulture.Održive ćelije sa netaknutom strukturom spoljašnje ćelijske membrane će odbiti Trypan Blue od prožimanja membrane.U slučaju da ćelijska membrana propušta zbog napredovanja njene stanične smrti, Trypan Blue može proći membransku barijeru, akumulirati se u ćelijskoj plazmi i obojiti ćeliju u plavo.Ova optička razlika može se koristiti za razlikovanje besprijekorno živih ćelija od mrtvih pomoću algoritama za prepoznavanje slike Countstar Mira FL.
- Slike tri ćelijske linije obojene Trypan Blue-om, snimljene u Countstar (R) Mira FL u modu svijetlog polja.
- Rezultati gradijenta razblaženja serije HEK 293