Protocol experimental
El % de citotoxicitat es calcula mitjançant l'equació següent.
% de citotoxicitat = (Recomptes vius de control – Recomptes vius de tractats) / Recomptes vius de control × 100
En etiquetar les cèl·lules tumorals diana amb calceïna AM no tòxica i no radioactiva o transfectar amb GFP, podem controlar la mort de les cèl·lules tumorals per les cèl·lules CAR-T.Tot i que les cèl·lules canceroses objectiu vives seran etiquetades per una calceïna verda AM o GFP, les cèl·lules mortes no poden retenir el colorant verd.Hoechst 33342 s'utilitza per tenyir totes les cèl·lules (tant cèl·lules T com cèl·lules tumorals), alternativament, les cèl·lules tumorals diana es poden tacar amb calceïna AM unida a la membrana, PI s'utilitza per tenyir les cèl·lules mortes (tant cèl·lules T com cèl·lules tumorals).Aquesta estratègia de tinció permet discriminar diferents cèl·lules.
E: Citotoxicitat dependent de la relació T de K562
L'exemple d'imatges fluorescents Hoechst 33342, CFSE, PI són les cèl·lules diana K562 a t = 3 hores
Les imatges fluorescents resultants van mostrar un augment de les cèl·lules diana Hoechst + CFSE + PI + a mesura que augmentava la relació E: T
