Eksperimental nga Protocol
Ang cytotoxicity% gikalkulo sa equation sa ubos.
Cytotoxicity % = (Live nga ihap sa kontrol – Live nga ihap sa gitambalan) / Live nga ihap sa kontrol × 100
Pinaagi sa pagmarka sa target nga tumor cells nga adunay non-toxic, non-radioactive calcein AM o transfect sa GFP, mamonitor nato ang pagpatay sa tumor cells pinaagi sa CAR-T cells.Samtang ang buhi nga target nga mga selula sa kanser markahan sa usa ka berde nga calcein AM o GFP, ang mga patay nga selula dili makatipig sa berde nga tina.Ang Hoechst 33342 gigamit alang sa mantsa sa tanan nga mga selula (parehong T nga mga selula ug mga selula sa tumor), sa laing paagi, ang target nga mga selula sa tumor mahimong namansahan sa lamad nga gigapos nga calcein AM, ang PI gigamit alang sa mantsa sa patay nga mga selula (parehong T nga mga selula ug mga selula sa tumor).Kini nga estratehiya sa pagmantsa nagtugot sa pagpihig sa lainlaing mga selula.
E: T Ratio dependent Cytotoxicity sa K562
Ang pananglitan nga Hoechst 33342, CFSE, PI fluorescent nga mga hulagway mao ang K562 nga target nga mga selula sa t = 3 ka oras
Ang resulta nga fluorescent nga mga hulagway nagpakita sa pagtaas sa Hoechst + CFSE + PI + Target nga mga selula samtang ang E: T ratio misaka