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Per a terapia cellulare CAR-T

  • 1.Cullizzioni
  • 2.Isulamentu
  • 3.Mudificazione
  • 4.Espansione
  • 5.A cugliera
  • 6.Product QC
  • 7.Trattamentu

Chì pudemu fà

  • AO/PI Viability
  • Citotossicità cellulare
  • Efficienza di trasfezzione
  • Apoptosi cellulare
  • Ciclu Cellulare
  • Marcatore CD
  • Cellule degenerate
  • Conte di cellule
  • Linea cellulare
AO/PI Viability
AO/PI Viability

Dual-fluorescence Viability (AO / PI), Acridine orange (AO) è propidium iodure (PI) sò coloranti nucleici nucleari è coloranti di legame à l'acidu.AO pò penetrà a membrana di e cellule morte è viventi è macchia u nucleu, generendu una fluoriscenza verde.In cuntrastu, PI pò solu permeate i membrani disintegrating di e cellule nucleate morte, generendu fluoriscenza rossa.A tecnulugia basata nantu à l'imaghjini di u Countstar Rigel esclude frammenti di cellula, detriti è particelle di artefatti, è ancu avvenimenti sottumessi cum'è piastrine, dendu un risultatu assai precisu.In cunclusioni, u sistema Countstar Rigel pò esse usatu per ogni passu di u prucessu di fabricazione di cellule.

Cell Cytotoxicity
Citotossicità cellulare

Citotossicità mediata da cellule T / NK, In a terapia di cellule CAR-T recentemente appruvata da a FDA, i linfociti T geneticamente ingegneri si leganu specificamente à e cellule cancerose (T) mirate è li uccidenu.L'analizzatori Countstar Rigel sò capaci di analizà stu prucessu cumpletu di citotossicità mediata da cellule T/NK.

I studii di citotossicità sò realizati etichettandu e cellule di cancro di destinazione cù CFSE o trasfettendu cù GFP.Hoechst 33342 pò esse usatu per tinghje tutte e cellule (cellule T è cellule tumorali).In alternativa, e cellule tumorali di destinazione ponu esse tinte cù CFSE.L'ioduru di propidium (PI) hè usatu per tinghje e cellule morte (cellule T è cellule tumorali).A discriminazione trà e diverse cellule pò esse ottenuta cù sta strategia di tintura.

Transfection Efficiency
Efficienza di trasfezzione

Efficienza di Trasfezione GFP, In genetica molekulari, diversi organismi mudelli è biologia cellulare, u genu GFP hè spessu usatu cum'è reporter per studii d'espressione.Attualmente, i scientisti utilizanu cumunimenti microscopi fluorescenti o citometri di flussu per analizà l'efficienza di trasfezzione di e cellule di mammiferi.Ma a gestione di a tecnulugia cumplessa di un citometru di flussu avanzatu richiede un operatore espertu è altamente qualificatu.Countstar Rigel permette à l'utilizatori di fà facilmente è accuratamente un test di efficienza di trasfezzione senza i costi di operazione è mantenimentu assuciati cù a citometria di flussu tradiziunale.

Cell Apoptosis
Apoptosi cellulare

Apoptosi cellulare, U prugressu di l'apoptosi cellulare pò esse monitoratu utilizendu Annexin-V conjugated FITC in cumbinazione cù 7-ADD.I residui di fosfatidilserina (PS) sò normalmente situati à a parte interna di a membrana plasmatica di e cellule sane.Durante l'apoptosi precoce, l'integrità di a membrana si perde è PS serà traslocatu à l'esterno di a membrana cellulare.L'annessina V ha una forte affinità per PS ed è quindi il marcatore ideale per le prime cellule apoptotiche.

Cell Cycle
Ciclu Cellulare

Ciclu cellulare, durante a divisione cellulare, e cellule cuntenenu quantità aumentate di DNA.Marcatu da PI, un aumentu di l'intensità di fluorescenza hè direttamente proporzionale à una accumulazione di DNA.I diffirenzii in l'intensità di fluorescenza di e cellule singole sò l'indicatori di u statutu attuale di u ciculu di e cellule MCF 7 cells sò stati trattati cù 4μM di Nocodazole per arrestà queste cellule in diverse tappe di u so ciculu cellulare.L'imaghjini di u campu luminoso acquistate durante stu scenariu di prova ci permettenu di identificà ogni cellula.U canale di fluorescenza PI di u Countstar Rigel identifica i signali di DNA di singole cellule ancu in aggregate.Un analisi detallatu di l'intensità di fluorescenza pò esse realizatu cù u FCS.

CD Marker
Marcatore CD

CD Marker Phenotyping, I mudelli Countstar Rigel offrenu un approcciu più veloce, più simplice è più sensibile à u fenotipamentu immuno-basatu di e cellule più efficace.Cù l'imaghjini d'alta risoluzione è e putenti capacità integrate di analisi di dati, u Countstar Rigel permette à l'utilizatori di ottene risultati sempre affidabili senza avè bisognu di paràmetri di cuntrollu cumplessi estensivi è aghjustamenti di compensazione di fluorescenza.

A differenziazione cellulare Cytokine Induced Killer (CIK) dimostra a qualità di prestazione eccezziunale di l'analizzatore Countstar Rigel in paragone direttu à i citometri di flussu di alta classe.I PBMC di u mouse in a cultura sò stati macchiati cù CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE è CD56-PE, è induce da Interleukin (IL) 6. Allora analizate simultaneamente cù Countstar® Rigel è Flow Cytometry.In questa prova, u CD3-CD4, u CD3-CD8, è u CD3-CD56 sò stati divisi in trè gruppi, per determinà a proporzione di diverse subpopulazioni di cellula.

Degenerated Cells
Cellule degenerate

A rilevazione di cellule degenerate per immunofluorescenza, l'anticorpi monoclonali chì producenu linee cellulari perderanu alcuni cloni pusitivi durante a proliferazione cellulare è u passaghju per via di degradazione o mutazioni genetiche.Una perdita più altu affettarà significativamente a produtividade di u prucessu di fabricazione.U monitoraghju di a degradazione ghjoca un rolu impurtante in u cuntrollu di u prucessu per trasfurmà u rendiment di l'anticorpi à l'ottimu.

A maiò parte di l'anticorpi fabbricati in l'industria BioPharma ponu esse rilevati da l'etichettatura di immunofluorescenza è analizati quantitativamente da a serie Countstar Rigel.L'imaghjini di u canale luminoso è di fluorescenza sottu mostranu chjaramente quelli cloni chì anu persu u so attributu per pruduce l'anticorpi desiderati.L'analisi più dettagliata cù u software DeNovo FCS Express Image cunfirma chì 86.35% di tutte e cellule esprimenu immunoglobuline, solu 3.34% sò chjaramente negativu.

Cell Counting
Conte di cellule

Trypan (capitalize B in Blue) Cell Counting, Trypan blue staining hè sempre usatu in a maiò parte di i laboratori di cultura cellulare.

U Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp pò esse installatu in tutti i mudelli Countstar Rigel.I nostri algoritmi di ricunniscenza di l'imaghjini prutetti analizanu più di 20 paràmetri per classificà ogni ughjettu rilevatu.

Cell Line
Linea cellulare

Cell Line Storage QC, In u almacenamentu cellulare, un cuncettu sofisticatu di gestione di qualità assicura un monitoraghju sicuru è efficiente di tutti i prudutti cellulari.Questu guarantisci a qualità stabile di e cellule criopreservate, criopreservate per esperimenti, sviluppu di prucessu è pruduzzione.

U Countstar Rigel acquista imaghjini d'alta risoluzione, analizendu diverse caratteristiche morfologiche di l'uggetti cellulari cum'è diametru, forma è tendenza à l'agregazione.L'imaghjini di e diverse tappe di u prucessu ponu esse facilmente paragunate.Allora variazioni in forma è aggregazione ponu esse facilmente rilevate, evitendu e misurazioni umane subjective.È a basa di dati Countstar Rigel hà un sistema di gestione sofisticatu per l'almacenamiento è a ricuperazione d'imaghjini è dati.

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