Vzorek obsahující buňky v suspenzi se smíchá s barvivem trypanová modř a poté se natáhne do Countstar Chamber Slide analyzovaného pomocí Countstar Automated Cell Counter.Přístroje Countstar, založené na klasickém principu počítání buněk trypanovou modří, integrují pokročilou technologii optického zobrazování, inteligentní technologii rozpoznávání obrazu a výkonné softwarové algoritmy, aby poskytovaly nejen koncentraci buněk a životaschopnost, ale také poskytovaly informace o buněčné koncentraci, životaschopnosti, rychlosti agregace, kulatosti. a rozdělení průměru pouze s jedním chodem.
Agregovaná buněčná analýza
Obrázek 3 Počítání agregovaných buněk.
A. Obrázek vzorku buňky;
B. Snímek vzorku buněk s identifikační značkou pomocí softwaru Countstar BioTech.(Zelený kruh: Živá buňka, Žlutý kruh: Mrtvá buňka, Červený kruh: Agregovaná buňka).
C. Agregovaný histogram
Některé primární buňky nebo buňky subkultury jsou náchylné k agregaci při špatném kultivačním stavu nebo nadměrném trávení, což způsobuje velké potíže při počítání buněk.Pomocí funkce kalibrace agregace může Countstar realizovat stimulační výpočet agregací pro zajištění přesného počítání buněk a získání rychlosti agregace a agregačního histogramu, čímž poskytuje experimentátorům základ pro posouzení stavu buněk.
Monitorování růstu buněk
Obrázek 4 Křivka růstu buněk.
Křivka růstu buněk je běžná metoda měření absolutního růstu počtu buněk, důležitý ukazatel pro stanovení buněčné koncentrace a jeden ze základních parametrů pro kultivaci základních biologických vlastností buněk.Aby bylo možné přesně popsat dynamickou změnu počtu buněk v průběhu celého procesu, lze typickou růstovou křivku rozdělit do 4 částí: inkubační doba s pomalým růstem;fáze exponenciálního růstu s velkým sklonem, fáze plošiny a období poklesu.Křivku růstu buněk lze získat vynesením počtu živých buněk (10 000/ml) proti době kultivace (h nebo d).
Měření buněčné koncentrace a životaschopnosti
Obrázek 1 Obrázky byly zachyceny pomocí Countstar BioTech, protože buňky (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 a MDCK) v suspenzi byly obarveny trypanovou modří.
Countstar je použitelný pro buňky o průměru mezi 5-180 um, jako jsou savčí buňky, hmyzí buňky a některé planktony.
Měření velikosti buňky
Obrázek 2 Měření velikosti buněk CHO buněk před a po transfekci plasmidu.
A. Obrázky suspenze buněk CHO obarvené trypanovou modří před a po transfekci plasmidu.
B. Porovnání histogramu velikosti buněk CHO před a po transfekci plasmidu.
Změna velikosti buněk je klíčovou vlastností a běžně se měří při výzkumu buněk.Normálně se bude měřit v těchto experimentech: buněčná transfekce, test léčiv a testy buněčné aktivace.Countstar poskytuje statistická morfologická data, jako jsou velikosti buněk, do 20 s.
Automatické počítadlo buněk Countstar může poskytnout morfologická data buněk, včetně histogramů kruhovitosti a průměru.
