En prøve indeholdende celler i suspension blandes med trypanblåt farvestof og trækkes derefter ind i Countstar Chamber Slide analyseret af Countstar Automated Cell Counter.Baseret på det klassiske trypan blå celletællingsprincip integrerer Countstars instrumenter avanceret optisk billedteknologi, intelligent billedgenkendelsesteknologi og kraftfulde softwarealgoritmer for ikke kun at give cellekoncentration og levedygtighed, men også give information om cellekoncentration, levedygtighed, aggregeringshastighed, rundhed , og diameterfordeling med kun én kørsel.
Aggregeret celleanalyse
Figur 3 Optælling af aggregerede celler.
A. Billede af celleprøve;
B. Billede af celleprøve med identifikationsmærke af Countstar BioTech-software.(Grøn cirkel: levende celle, gul cirkel: død celle, rød cirkel: aggregeret celle).
C. Aggregeret Histogram
Nogle primære celler eller subkulturceller er tilbøjelige til at aggregere, når dyrkningstilstanden er dårlig eller overdreven fordøjelse, hvilket forårsager store vanskeligheder med at tælle celler.Med Aggregation Calibration Function kan Countstar realisere en stimuleringsberegning af aggregeringer for at sikre nøjagtig celletælling og opnå aggregeringshastigheden og aggregeringshistogrammet, hvilket giver grundlag for forsøgspersoner til at bedømme cellernes tilstand.
Overvågning af cellevækst
Figur 4 Cellevækstkurve.
Cellevækstkurve er en almindelig metode til at måle den absolutte vækst af celleantal, en vigtig indikator til bestemmelse af cellekoncentration og en af de grundlæggende parametre for dyrkning af cellers grundlæggende biologiske egenskaber.For nøjagtigt at beskrive den dynamiske ændring i antallet af celler gennem hele processen, kan den typiske vækstkurve opdeles i 4 dele: inkubationsperiode med langsom vækst;eksponentiel vækstfase med stor hældning, plateaufase og nedgangsperiode.Cellevækstkurven kan opnås ved at plotte antallet af levende celler (10.000/ml) mod dyrkningstiden (h eller d).
Måling af cellekoncentration og levedygtighed
Figur 1 Billeder blev fanget af Countstar BioTech, da celler (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 og MDCK) i suspension blev farvet med henholdsvis Trypan Blue.
Countstar er anvendelig til celler med diameter mellem 5-180um, som pattedyrceller, insektceller og nogle planktoner.
Cellestørrelsesmåling
Figur 2 Cellestørrelsesmåling af CHO-celler før og efter plasmidtransfektionen.
A. Billeder af CHO-cellesuspension farvet med trypanblåt før og efter plasmidtransfektionen.
B. Sammenligning af CHO-cellestørrelseshistogram før og efter plasmidtransfektionen.
Ændringen af cellestørrelse er et nøgletræk og måles almindeligvis i celleforskning.Normalt vil det blive målt i disse eksperimenter: celletransfektion, lægemiddeltest og celleaktiveringsassays.Countstar leverer statistiske morfologidata, såsom størrelsen af celler, inden for 20s.
Countstar automatiseret celletæller kan give de morfologiske data for celler, herunder cirkularitets- og diameterhistogrammer.
