Mesenkymale stamceller er en undergruppe af pluripotente stamceller, som kan isoleres fra mesodermen.Med deres fornyelse af selvreplikation og differentieringsegenskaber i flere retninger besidder de et højt potentiale for forskellige terapier inden for medicin.Mesenkymale stamceller har en unik immunfænotype og immunreguleringsevne.Derfor er mesenkymale stamceller allerede meget brugt i stamcelletransplantationer, vævsmanipulation og organtransplantation.Og ud over disse applikationer bruges de som et ideelt værktøj i vævsteknologi som såceller i en række grundlæggende og kliniske forskningseksperimenter.
Countstar Rigel kan overvåge koncentrationen, levedygtigheden, apoptoseanalysen og fænotypekarakteristika (og deres ændringer) under produktionen og differentieringen af disse stamceller.Countstar Rigel har også fordelen ved at opnå yderligere morfologisk information, leveret af det permanente lyse felt og fluorescensbaserede billedoptagelser under hele processen med cellekvalitetsovervågning.Countstar Rigel tilbyder en hurtig, sofistikeret og pålidelig metode til kvalitetskontrol af stamceller.
Overvågning af MSC'ers levedygtighed i regenerativ medicin
Figur 1 Overvågning af levedygtighed og celletal af mesenkymale stamceller (MSC'er) til brug i celleterapier
Stamcelle er en af de mest lovende behandlinger inden for regenerative celleterapier.Fra høst af MSC til behandling er det vigtigt at opretholde en høj stamcellelevedygtighed under alle trin af stamcelleproduktionen (figur 1).Countstars stamcelletæller overvåger stamcellernes levedygtighed og koncentration for at spille en afgørende rolle i kvalitetskontrol.
Overvågning af MSC morfologiske ændringer efter transporten
Diameteren og aggregeringen blev også bestemt af Countstar Rigel.Diameteren af AdMSC'er blev ændret drastisk efter transport sammenlignet med før transport.Diameteren af før transport var 19 µm, men den steg til 21 µm efter transport.Aggregeringen af før transport var 20%, men den steg til 25% efter transport.Fra billederne, som blev taget af Countstar Rigel, blev fænotypen af AdMSC'er ændret drastisk efter transport.Resultaterne er vist i figur 3.
Identifikation af AdMSC'er i cellefænotype
I øjeblikket er minimumsstandardidentifikationstestprocedurerne til kvalitetssikring af overvågede MSC'er opført i en erklæring fra International Society for Cellular Therapy (ISCT), defineret allerede i 2006.
Hurtig detektion af apoptose i MSC'er med FITC-konjugeret Annexin-V og 7-ADD Introduktion
Celleapoptose kan påvises med FITC-konjugeret annexin-V og 7-ADD.PS findes normalt kun på plasmamembranens intracellulære folder i raske celler, men under tidlig apoptose går membranasymmetrien tabt, og PS translokerer til den ydre folder.
Figur 6 Detektion af apoptose i MSC'er af Countstar Rigel
A. Visuel inspektion af fluorescensbilledet af påvisning af apoptose i MSC'er
B. Spredningsplot af apoptose i MSC'er ved FCS-ekspres
C. Procentdel af cellepopulation baseret på % normale, % apoptotiske og % nekrotiske/meget sent stadium apoptotiske celler.