Eine Probe, die Zellen in Suspension enthält, wird mit Trypanblau-Farbstoff gemischt und dann in den Countstar Chamber Slide gezogen, der vom Countstar Automated Cell Counter analysiert wird.Basierend auf dem klassischen Trypanblau-Zellzählprinzip integrieren die Instrumente von Countstar fortschrittliche optische Bildgebungstechnologie, intelligente Bilderkennungstechnologie und leistungsstarke Softwarealgorithmen, um nicht nur die Zellkonzentration und -lebensfähigkeit zu liefern, sondern auch Informationen über Zellkonzentration, Lebensfähigkeit, Aggregationsrate und Rundheit , und Durchmesserverteilung mit nur einem Lauf.
Aggregierte Zellanalyse
Abbildung 3 Zählung aggregierter Zellen.
A. Bild der Zellprobe;
B. Bild einer Zellprobe mit Identifikationsmarkierung durch die Countstar BioTech-Software.(Grüner Kreis: lebende Zelle, gelber Kreis: tote Zelle, roter Kreis: aggregierte Zelle).
C. Aggregiertes Histogramm
Einige Primärzellen oder Subkulturzellen neigen dazu, sich bei schlechtem Kulturzustand oder übermäßiger Verdauung zu aggregieren, was große Schwierigkeiten beim Zählen von Zellen verursacht.Mit der Aggregationskalibrierungsfunktion kann Countstar eine Stimulationsberechnung von Aggregationen durchführen, um eine genaue Zellzählung sicherzustellen und die Aggregationsrate und das Aggregationshistogramm zu erhalten, wodurch Experimentatoren eine Grundlage zur Beurteilung des Zellzustands erhalten.
Überwachung des Zellwachstums
Abbildung 4 Zellwachstumskurve.
Die Zellwachstumskurve ist eine gängige Methode zur Messung des absoluten Wachstums der Zellzahl, ein wichtiger Indikator zur Bestimmung der Zellkonzentration und einer der grundlegenden Parameter für die Kultur der grundlegenden biologischen Eigenschaften von Zellen.Um die dynamische Veränderung der Zellzahl während des gesamten Prozesses genau zu beschreiben, kann die typische Wachstumskurve in 4 Teile unterteilt werden: Inkubationszeit mit langsamem Wachstum;exponentielle Wachstumsphase mit großer Steigung, Plateauphase und Rückgangsphase.Die Zellwachstumskurve erhält man, indem man die Anzahl der lebenden Zellen (10'000/mL) gegen die Kulturzeit (h oder d) aufträgt.
Messung der Zellkonzentration und -viabilität
Abbildung 1 Bilder wurden von Countstar BioTech aufgenommen, als Zellen (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 und MDCK) in Suspension jeweils mit Trypanblau gefärbt wurden.
Countstar ist anwendbar auf Zellen mit einem Durchmesser zwischen 5 und 180 um, wie Säugetierzellen, Insektenzellen und einige Planktonzellen.
Zellgrößenmessung
Abbildung 2 Zellgrößenmessung von CHO-Zellen vor und nach der Plasmidtransfektion.
A. Bilder der mit Trypanblau gefärbten CHO-Zellsuspension vor und nach der Plasmidtransfektion.
B. Vergleich des Histogramms der CHO-Zellgröße vor und nach der Plasmidtransfektion.
Die Veränderung der Zellgröße ist ein Schlüsselmerkmal und wird üblicherweise in der Zellforschung gemessen.Normalerweise wird es in diesen Experimenten gemessen: Zelltransfektion, Arzneimitteltest und Zellaktivierungsassays.Countstar liefert innerhalb von 20 Sekunden statistische Morphologiedaten, wie z. B. die Größe von Zellen.
Der automatisierte Zellzähler von Countstar kann die morphologischen Daten von Zellen liefern, einschließlich Rundheits- und Durchmesserhistogramme.