Die Immunphänotypisierungsanalyse ist ein typisches Experiment, das in zellbezogenen Forschungsbereichen durchgeführt wird, um verschiedene Krankheiten (Autoimmunkrankheit, Immunschwächekrankheit, Tumordiagnose, Hämostase, allergische Krankheiten und viele mehr) und Krankheitspathologien zu diagnostizieren.Es wird auch verwendet, um die Zellqualität in der Forschung zu verschiedenen Zellkrankheiten zu testen.Durchflusszytometrie und Fluoreszenzmikroskopie sind die routinemäßigen Analysemethoden in Forschungsinstituten für Zellkrankheiten, die für die Immunphänotypisierung verwendet werden.Diese Analyseverfahren können jedoch entweder nur Bilder oder Datenreihen liefern, die den strengen Zulassungsanforderungen der Regulierungsbehörden möglicherweise nicht genügen.
M. Dominici el, Zytotherapie (2006) Vol. 3, No.8, Nr. 4, 315-317
Identifizierung des Immunphänotyps von AdMSCs
Der Immunphänotyp von AdMSCs wurde mit Countstar FL bestimmt, AdMSCs wurden jeweils mit unterschiedlichen Antikörpern (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 und HLADR) inkubiert.Ein Signalfarbenanwendungsverfahren wurde erstellt, indem der grüne Kanal eingestellt wurde, um PE-Fluoreszenz abzubilden, plus ein helles Feld.Eine Hellfeldbild-Referenzsegmentierung wurde als Maske angewendet, um das PE-Fluoreszenzsignal abzutasten.Die Ergebnisse von CD105 wurden gezeigt (Abbildung 1).
Abbildung 1 Identifizierung des Immunphänotyps von AdMSCs.A. Hellfeld- und Fluoreszenzbild von AdMSCs;B. CD-Marker-Erkennung von AdMSCs durch Countstar FL
Qualitätskontrolle von MSCs – Validierung der Ergebnisse für jede einzelne Zelle
Abbildung 2 A: Die Countstar FL-Ergebnisse wurden in FCS express 5plus angezeigt, wobei der positive Prozentsatz von CD105 und die Übersichtstabelle einzelner Zellen angezeigt wurden.B: Angepasstes Gating auf der rechten Seite, die Bilder der Einzelzelltabelle zeigen die Zellen mit hoher CD105-Expression.C: Angepasstes Gating auf der linken Seite, die Bilder der Einzelzellentabelle zeigen die Zellen mit geringer Expression von CD105.
Phänotypische Veränderungen während des Transports
Abbildung 3. A: Quantitative Analyse des positiven Prozentsatzes von CD105 in verschiedenen Proben durch FCS express 5 plus Software.B: Hochwertige Bilder liefern zusätzliche morphologische Informationen.C: Validierte Ergebnisse durch Miniaturansichten jeder einzelnen Zelle, die FCS-Softwaretools unterteilten die Zellen in verschiedene
