AOPI Duobla-fluoreska kalkulado estas la analizspeco uzita por detektado de ĉelkoncentriĝo kaj daŭrigebleco.La solvo estas kombinaĵo de akridina oranĝo (la verd-fluoreska nuklea acida makulo) kaj propidiojodudo (la ruĝa-fluoreska nukleaacida makulo).Propidiojoduro (PI) estas membranekskludfarbo kiu nur eniras ĉelojn kun endanĝerigitaj membranoj, dum akridinaranĝo povas penetri ĉiujn ĉelojn en populacio.Kiam ambaŭ tinkturfarboj ĉeestas en la nukleo, propidiojoduro kaŭzas redukton en akridina oranĝa fluoreskeco per fluoreskeca resonanca energitransigo (FRET).Kiel rezulto, nukleaj ĉeloj kun sendifektaj membranoj makulas fluoreska verda kaj estas kalkulitaj kiel vivaj, dum nukleaj ĉeloj kun endanĝerigitaj membranoj nur makulas fluoreskan ruĝe kaj estas kalkulitaj kiel mortaj kiam ili uzas la Countstar® FL-sistemon.Nenuklea materialo kiel ruĝaj globuloj, trombocitoj kaj derompaĵoj ne fluoreskas kaj estas ignorataj de la programaro Countstar® FL.
Procezo de Stamĉela Terapio
Figuro 4 Monitorado de daŭrigebleco kaj ĉelkalkulo de mezenkimaj stamĉeloj (MSCoj) por la uzo en ĉelaj terapioj.
Determini MSC-viveblecon per AO/PI kaj Trypan Blue-analizo
Figuro 2. A. Bildo de MSC makulita de AO/PI kaj Trypan Blue;2. Komparo de AO/PI kaj Trypan-blua rezulto antaŭ kaj post transporto.
La ĉelo refrakta indekso ŝanĝiĝas, Trypan Blue-makulado ne estis tiel evidenta, estas malfacile determini la daŭrigeblecon post transporto.Dum dukolora fluoreskeco permesas makuladon de vivaj kaj mortaj nukleaj ĉeloj, generado de precizaj daŭrigeblecoj eĉ en la ĉeesto de derompaĵoj, trombocitoj kaj eritrocitoj.
