Countstar Mira FL

Características del producto

Tecnología innovadora de multiplicación óptica

La exclusiva tecnología de zoom permite a los usuarios analizar células en una amplia gama de diámetros

Cuando se utilizan las plantillas BioApp de campo claro en , la novedosa tecnología de zoom permite al operador identificar con precisión objetos celulares dentro de un rango de diámetro de 1,0 µm a 180,0 µm.Las imágenes adquiridas muestran incluso los detalles de las células individuales.Esto amplía la gama de aplicaciones incluso a objetos celulares, que no podían analizarse con precisión en el pasado.

Algoritmos de análisis de imágenes basados ​​en IA progresiva

El FL utiliza las ventajas de la Inteligencia Artificial para desarrollar algoritmos de autoaprendizaje.Son capaces de identificar y analizar múltiples características de las células.La integración de los parámetros de forma celular permite un análisis altamente preciso y reproducible del estado del ciclo celular y/o brinda datos sobre la correlación entre el cambio en la morfología celular, la formación de grupos de células (agregados, esferoides de tamaño pequeño) y las condiciones que afectan.

Resultados del etiquetado de células madre mesenquimales de forma irregular (MSC; magnificación 5x) en un cultivo en proliferación

• Los círculos verdes marcan las células vivas
• Los círculos rojos marcan las células muertas
• Células agregadas de círculos blancos

La línea celular RAW264.7 es pequeña y se agrupa fácilmente.El algoritmo AI puede identificar las células en los grupos y contar

• Los círculos verdes marcan las células vivas
• Los círculos rojos marcan las células muertas
• Células agregadas de círculos blancos

Tamaño desigual de las células embrionarias de pez cebra (aumento de 6,6X)

• Los círculos verdes marcan las células vivas
• Los círculos rojos marcan las células muertas
• Células agregadas de círculos blancos

Diseño intuitivo de interfaz gráfica de usuario (GUI)

La GUI claramente estructurada permite una ejecución de experimentos eficiente y cómoda

• Amplia biblioteca con tipos de células preestablecidos y BioApps (protocolos de plantilla de ensayo).Solo un clic en la BioApp y la prueba puede comenzar.
• La GUI fácil de usar facilita el cambio entre las diferentes opciones de menú y garantiza una experiencia de prueba cómoda
• Los módulos de menú claramente estructurados ayudan al usuario en la rutina de prueba diaria

Seleccione la BioApp, ingrese una ID de muestra e inicie la ejecución del ensayo

128 GB de capacidad de almacenamiento de datos internos, suficiente para almacenar aprox.50.000 resultados de análisis en el (R) Mira.Para un acceso rápido, los datos deseados se pueden seleccionar mediante varias opciones de búsqueda.

Una función útil para ahorrar tiempo es la calculadora de dilución recuperable.Entregará los volúmenes exactos de diluyente y muestra celular original, una vez que se ingrese la concentración final de células y el volumen objetivo.Esto hace que el paso de las células a sus subcultivos sea cómodo.

Múltiples funciones de aplicación

Las funciones de análisis de Countstar Mira ayudan al usuario a comprender los cambios dinámicos dentro de un cultivo celular y ayudan a optimizar sus condiciones de crecimiento.

El software avanzado de reconocimiento de imágenes basado en IA de es capaz de ofrecer múltiples parámetros.Además de los resultados estándar de concentración celular y estado de viabilidad, la distribución del tamaño de las células, la posible formación de grupos de células, la intensidad de fluorescencia relativa de cada célula individual, la forma de una curva de crecimiento y su factor de morfología externa son parámetros importantes para evaluar el real Estado de un cultivo celular.Los gráficos generados automáticamente de curvas de crecimiento, distribución de diámetro e histogramas de intensidad de fluorescencia, análisis de células individuales dentro de agregados y determinación del parámetro de compacidad celular facilitan al usuario comprender mejor los procesos dinámicos dentro de un cultivo celular examinado desde el principio hasta la finalización del proceso.

Histograma

Histograma de distribución de intensidad de fluorescencia relativa (RFI)

Histograma de distribución de diámetro

curva de crecimiento

Imagen(es) de prueba y resultados

diagrama de la curva de crecimiento

Aplicación del producto

Ensayos de viabilidad y densidad celular de fluorescencia dual AO/PI

El método de tinción de fluorescencia dual AO/PI se basa en el principio de que ambos colorantes, naranja de acridina (AO) y yoduro de propidio (PI), se intercalan entre los ácidos nucleicos del cromosoma en el núcleo de una célula.Mientras que AO es capaz de penetrar las membranas intactas del núcleo en cualquier momento y teñir el ADN, PI solo puede atravesar la membrana comprometida del núcleo de una célula moribunda (muerta).El AO acumulado en el núcleo de la célula emite una luz verde a un máximo de 525nm, si se excita a 480nm, el PI emite una luz roja con su amplitud a 615nm, cuando se excita a 525nm.El efecto FRET (Foerster Resonance Energy Transfer) garantiza que la señal emitida de AO a 525 nm se absorbe en presencia del tinte PI para evitar la doble emisión de luz y el desbordamiento.Esta combinación especial de colorantes de AO/PI permite filtrar específicamente células que contienen núcleos en presencia de acariotas como eritrocitos.

Los datos de Countstar Mira FL mostraron una buena linealidad para la dilución de gradiente de células HEK293

Análisis de eficiencia de transfección GFP/RFP

La eficiencia de la transfección es un índice importante en el desarrollo y la optimización de líneas celulares, en la sintonización de vectores virales y para el control del rendimiento del producto en los procesos biofarmacéuticos.Se ha convertido en la prueba establecida con más frecuencia para determinar de forma rápida y fiable el contenido de una proteína diana dentro de una célula.En varios enfoques de terapia génica, es una herramienta indispensable para controlar la eficiencia de transfección de la modificación genética deseada.

El no solo proporciona resultados precisos y precisos, en comparación con la citometría de flujo, sino que además el analizador proporciona imágenes como prueba de evidencia.Además de esto, simplifica y acelera significativamente el análisis para agilizar el desarrollo de un proceso de desarrollo y producción.

Serie de imágenes, adquiridas por Countstar (R) Mira, que muestran niveles crecientes de eficiencia de transfección (de izquierda a derecha) de células modificadas genéticamente (línea celular HEK 293; expresando GFP en diferentes concentraciones)

Resultados de mediciones comparativas, ejecutadas con un B/C CytoFLEX, que confirman los datos de eficiencia de transfección de GFP de células HEK 293 modificadas, analizadas en un Countstar Mira

Análisis de viabilidad de Trypan Blue ampliamente establecido

El ensayo de discriminación de viabilidad Trypan Blue sigue siendo uno de los métodos más utilizados y fiables para determinar el número de células muertas (moribundas) dentro de un cultivo de células en suspensión.Las células viables con una estructura de membrana celular externa intacta evitarán que Trypan Blue penetre en la membrana.En caso de que la membrana celular tenga fugas debido al progreso de su muerte celular, Trypan Blue puede atravesar la barrera de la membrana, acumularse en el plasma celular y teñir la célula de azul.Esta diferencia óptica se puede utilizar para distinguir las células vivas inmaculadas de las células muertas mediante los algoritmos de reconocimiento de imágenes de FL.

• Imágenes de tres líneas celulares teñidas con Trypan Blue, adquiridas en un Countstar (R) Mira FL en modo de campo claro.

• Resultados de un gradiente de dilución de la serie HEK 293