Bioloogilised ja AAV-põhised geeniteraapiad võidavad haiguste ravis üha suuremat turuosa.Tugeva ja tõhusa imetajate rakuliini väljatöötamine nende tootmiseks on aga keeruline ja nõuab tavaliselt ulatuslikku raku iseloomustamist.Ajalooliselt on nendes rakupõhistes analüüsides kasutatud voolutsütomeetrit.Voolutsütomeeter on aga suhteliselt kallis ja nõuab põhjalikku koolitust nii tööks kui ka hoolduseks.Hiljuti on arvutusvõimaluste ja kvaliteetsete kaamerasensorite kasvuga uuendatud pildipõhist tsütomeetriat, et pakkuda rakuliini protsesside arendamiseks täpset ja kulutõhusat alternatiivi.Selles töös kirjeldasime rakuliini arendamise töövoogu, mis sisaldab pildipõhist tsütomeetrit, nimelt Countstar Rigeli, transfektsiooni efektiivsuse hindamiseks ja stabiilse kogumi hindamiseks, kasutades vastavalt CHO ja HEK293 rakke, mis ekspresseerivad vastavalt antikeha ja rAAV vektorit.Kahes juhtumiuuringus näitasime:
1. Countstar Rigel andis voolutsütomeetriaga sarnase tuvastamise täpsuse.
2. Countstar Rigelil põhinev kogumi hindamine võib aidata määrata ühe raku kloonimiseks (SCC) soovitud rühma.
3. Countstar Rigel integreeritud rakuliini arendusplatvorm saavutas 2,5 g/l mAb tiitri.
Arutasime ka võimalust kasutada Countstari rAAV DoE-põhise optimeerimise sihtmärgi teise kihina.
Lisateabe saamiseks klõpsake siin
