آنالیز فنوتایپینگ ایمنی یک آزمایش معمولی است که در زمینههای تحقیقاتی مرتبط با سلول برای تشخیص بیماریهای مختلف (بیماری خود ایمنی، بیماری نقص ایمنی، تشخیص تومور، هموستاز، بیماریهای آلرژیک و بسیاری موارد دیگر) و آسیبشناسی بیماری انجام میشود.همچنین برای آزمایش کیفیت سلول در تحقیقات بیماری های سلولی مختلف استفاده می شود.فلوسیتومتری و میکروسکوپ فلورسانس روشهای معمول آنالیز در مؤسسات تحقیقاتی بیماریهای سلولی هستند که برای فنوتیپسازی ایمنی مورد استفاده قرار میگیرند.اما این روشهای تجزیه و تحلیل میتوانند فقط تصاویر یا سری دادهها را ارائه دهند که ممکن است الزامات تأیید دقیق مقامات نظارتی را برآورده نکنند.
M Dominici el, Cytotherapy (2006) Vol.8، شماره 4، 315-317
شناسایی فنوتیپ ایمنی AdMSCs
ایمونوفنوتیپ AdMSCها توسط Countstar FL تعیین شد، AdMSCها به ترتیب با آنتی بادی های مختلف (CD29، CD34، CD45، CD56، CD73، CD105، و HLADR) انکوبه شدند.یک روش اعمال رنگ سیگنال با تنظیم کانال سبز برای تصویر فلورسانس PE، به علاوه یک میدان روشن ایجاد شد.قطعهبندی مرجع تصویر میدان روشن به عنوان یک ماسک برای نمونهبرداری از سیگنال فلورسانس PE استفاده شد.نتایج CD105 نشان داده شد (شکل 1).
شکل 1 شناسایی فنوتیپ ایمنی AdMSCs.الف. میدان روشن و تصویر فلورسانس AdMSCs.ب. تشخیص نشانگر CD AdMSC توسط Countstar FL
کنترل کیفیت سلول های بنیادی مزانشیمی - تایید نتایج برای هر سلول
شکل 2 الف: نتایج Countstar FL در FCS express 5plus نمایش داده شد که درصد مثبت CD105 و سلول های جدول کلی را در نظر گرفت.ب: دریچه تنظیم شده در سمت راست، تصاویر جدول تک سلولی سلول هایی را با بیان بالای CD105 نشان می دهد.ج: دریچه تنظیم شده به سمت چپ، تصاویر جدول تک سلولی سلول هایی با بیان کم CD105 را نشان می دهد.
تغییرات فنوتیپی در حین حمل و نقل
شکل 3. الف: تجزیه و تحلیل کمی درصد مثبت CD105 در نمونه های مختلف توسط نرم افزار FCS express 5 plus.ب: تصاویر با کیفیت بالا اطلاعات مورفولوژیکی بیشتری را ارائه می دهند.ج: نتایج تایید شده توسط ریز عکسهای هر سلول منفرد، ابزار نرم افزار FCS سلول ها را به قسمت های مختلف تقسیم می کند.