AOPI Dual-fluoresces counting نوع سنجشی است که برای تشخیص غلظت و زنده ماندن سلول استفاده می شود.محلول ترکیبی از آکریدین نارنجی (رنگ اسید نوکلئیک سبز-فلورسنت) و پروپیدیوم یدید (لکه اسید نوکلئیک قرمز فلورسنت) است.پروپیدیوم یدید (PI) یک رنگ حذف غشایی است که فقط وارد سلول‌هایی می‌شود که غشاهای آسیب‌دیده دارند، در حالی که آکریدین نارنجی قادر است به تمام سلول‌های یک جمعیت نفوذ کند.هنگامی که هر دو رنگ در هسته وجود دارند، یدید پروپیدیوم باعث کاهش فلورسانس نارنجی آکریدین با انتقال انرژی رزونانس فلورسانس (FRET) می شود.در نتیجه، سلول‌های هسته‌دار با غشای سالم رنگ سبز فلورسنت دارند و به‌عنوان زنده شمرده می‌شوند، در حالی که سلول‌های هسته‌دار با غشاهای آسیب‌دیده فقط قرمز فلورسنت را رنگ می‌کنند و هنگام استفاده از سیستم Countstar® FL مرده محسوب می‌شوند.مواد غیر هسته ای مانند گلبول های قرمز، پلاکت ها و باقی مانده ها فلورسانس نمی کنند و توسط نرم افزار Countstar® FL نادیده گرفته می شوند.
فرآیند درمان با سلول های بنیادی
شکل 4 نظارت بر زنده ماندن و تعداد سلول های سلول های بنیادی مزانشیمی (MSCs) برای استفاده در سلول درمانی.
تعیین زنده ماندن MSC با استفاده از روش AO/PI و Trypan Blue
شکل 2. الف. تصویر MSC رنگ آمیزی شده توسط AO/PI و Trypan Blue.2. مقایسه AO/PI و نتیجه آبی Trypan قبل و بعد از حمل و نقل.
ضریب انکسار سلولی تغییر می کند، رنگ آمیزی تریپان آبی چندان واضح نیست، تعیین زنده بودن پس از حمل و نقل دشوار است.در حالی که فلورسانس دو رنگ امکان رنگ‌آمیزی سلول‌های هسته‌دار زنده و مرده را فراهم می‌کند، حتی در حضور باقی مانده‌ها، پلاکت‌ها و گلبول‌های قرمز خون، زنده ماندن دقیقی ایجاد می‌کند.
