La thérapie cellulaire est sans aucun doute un nouvel espoir pour diriger l'avenir de la biomédecine, mais l'application des cellules humaines en médecine n'est pas un nouveau concept.Au cours des dernières décennies, la thérapie cellulaire a fait de grands progrès, et la thérapie cellulaire elle-même n'est plus une simple collection de cellules et de retour infusé.Les cellules doivent maintenant souvent faire l'objet d'une bio-ingénierie, comme la thérapie cellulaire CAR-T.Notre objectif est de vous fournir un équipement standardisé de niveau GMP pour le contrôle de la qualité des cellules.Le produit a été accepté par de nombreuses entreprises à la tête de la thérapie cellulaire, nous pouvons aider notre client à construire un système de surveillance de la viabilité et de la concentration cellulaire stable et fiable.
Défi dans le nombre de cellules et la viabilité
Au cours de toutes les étapes de la fabrication clinique des cellules CAR-T, la viabilité et le nombre de cellules doivent être déterminés avec précision.
Les cellules primaires fraîchement isolées ou les cellules en culture peuvent contenir des impuretés, plusieurs types cellulaires ou des particules interférentes telles que des débris cellulaires qui rendront impossible l'analyse des cellules d'intérêt.
Comptage de la viabilité à double fluorescence par Countstar Rigel S2
L'acridine orange (AO) et l'iodure de propidium (PI) sont des colorants de liaison aux acides nucléiques nucléaires.L'AO peut pénétrer dans les cellules mortes et vivantes et colore les cellules nucléées pour générer une fluorescence verte.Le PI peut colorer les cellules nucléées mortes avec des membranes compromises et générer une fluorescence rouge.L'analyse exclut les fragments cellulaires, les débris et les particules d'artefacts ainsi que les événements sous-dimensionnés tels que les plaquettes, ce qui donne un résultat très précis.En conclusion, le système S2 peut être utilisé à chaque étape du processus de fabrication des cellules.
A: la méthode AO/PI peut distinguer avec précision l'état vivant et mort des cellules, et peut également exclure les interférences.En testant les échantillons de dilution, la méthode à double fluorescence montre des résultats stables.
Détermination de la cytotoxicité médiée par les cellules T/NK
En marquant les cellules tumorales cibles avec de la calcéine AM non toxique et non radioactive ou en transfectant avec GFP, nous pouvons surveiller la destruction des cellules tumorales par les cellules CAR-T.Alors que les cellules cancéreuses cibles vivantes seront marquées par une calcéine verte AM ou GFP, les cellules mortes ne peuvent pas retenir le colorant vert.Hoechst 33342 est utilisé pour colorer toutes les cellules (cellules T et cellules tumorales), alternativement, les cellules tumorales cibles peuvent être colorées avec de la calcéine AM liée à la membrane, PI est utilisé pour colorer les cellules mortes (cellules T et cellules tumorales).Cette stratégie de coloration permet de discriminer différentes cellules.
Comptage cellulaire cohérent et gestion globale des données
Un problème courant dans le comptage de cellules conventionnel est les différences de données entre les utilisateurs, les services et les sites.Tous les analyseurs comptent de la même manière dans différents endroits ou sites de production.En effet, dans le processus de contrôle qualité, chaque instrument doit être calibré sur l'instrument standard.
La banque de données centrale permet à l'utilisateur de conserver toutes les données, telles que le rapport de test de l'instrument, le rapport d'échantillon de cellule et la signature électronique du testeur, de manière sûre et permanente.
Thérapie par les cellules T en voiture : un nouvel espoir pour le traitement du cancer
La thérapie cellulaire CAR-T est sans aucun doute un nouvel espoir pour diriger l'avenir de la biomédecine contre le cancer.Au cours de toutes les étapes de la fabrication clinique des cellules CAR-T, la viabilité et le nombre de cellules doivent être déterminés avec précision.
Le Countstar Rigel a été accepté par de nombreuses entreprises à la tête de la thérapie cellulaire CAR-T, nous pouvons aider notre client à construire un système de surveillance de la viabilité et de la concentration cellulaire stable et fiable.