L'analyse d'immuno-phénotypage est une expérience typique réalisée dans les domaines de recherche liés aux cellules pour diagnostiquer diverses maladies (maladie auto-immune, maladie d'immunodéficience, diagnostic de tumeur, hémostase, maladies allergiques, etc.) et la pathologie de la maladie.Il est également utilisé pour tester la qualité des cellules dans diverses recherches sur les maladies cellulaires.La cytométrie en flux et le microscope à fluorescence sont les méthodes d'analyse de routine dans les instituts de recherche sur les maladies cellulaires utilisées pour l'immuno-phénotypage.Mais ces méthodes d'analyse peuvent fournir uniquement des images ou des séries de données, qui peuvent ne pas répondre aux exigences strictes d'approbation des autorités réglementaires.
M Dominici el, Cytothérapie (2006) Vol.8, n° 4, 315-317
Identification de l'immuno-phénotype des AdMSC
L'immunophénotype des AdMSC a été déterminé par FL, les AdMSC ont été incubés avec différents anticorps respectivement (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 et HLADR).Une procédure d'application de couleur de signal a été créée en réglant le canal vert sur la fluorescence PE de l'image, plus un champ clair.Une segmentation de référence d'image en champ clair a été appliquée comme masque pour échantillonner le signal de fluorescence PE.Les résultats de CD105 ont été présentés (Figure 1).
Figure 1 Identification de l'immuno-phénotype des AdMSC.A. Image en champ clair et en fluorescence des AdMSC ;B. Détection du marqueur CD des AdMSC par FL
Contrôle qualité des MSC - validation des résultats pour chaque cellule
Figure 2 A : Les résultats de FL ont été affichés dans FCS express 5plus, gating le pourcentage positif de CD105 et les cellules individuelles du tableau de synthèse.B : Gating ajusté sur le côté droit, les images du tableau à cellule unique montrent les cellules à forte expression de CD105.C : Gating ajusté sur le côté gauche, les images du tableau des cellules individuelles montrent les cellules à faible expression de CD105.
Changements phénotypiques pendant le transport
Figure 3. A : Analyse quantitative du pourcentage positif de CD105 dans différents échantillons par le logiciel FCS express 5 plus.B : Des images de haute qualité fournissent des informations morphologiques supplémentaires.C : Résultats validés par des vignettes de chaque cellule, les outils logiciels FCS ont divisé les cellules en différentes
