Unha mostra que contén células en suspensión mestúrase con colorante azul Trypan, e despois tírase no portaobjetos de cámara Countstar analizado polo Contador de células automatizado de Countstar.Baseados no principio clásico de reconto de células azul tripano, os instrumentos de Countstar integran tecnoloxía de imaxe óptica avanzada, tecnoloxía de recoñecemento de imaxe intelixente e potentes algoritmos de software para non só proporcionar a concentración e viabilidade celular, senón tamén proporcionar información sobre a concentración celular, viabilidade, taxa de agregación e redondez. , e distribución de diámetro cunha única tirada.
Análise celular agregada
Figura 3 Reconto de células agregadas.
A. Imaxe da mostra celular;
B. Imaxe da mostra celular con marca de identificación polo software Countstar BioTech.(Círculo Verde: Célula viva, Círculo Amarelo: Célula morta, Círculo Vermello: Célula agregada).
C. Histograma agregado
Algunhas células primarias ou células de subcultivo son propensas a agregarse cando o cultivo está mal estado ou a dixestión excesiva, causando así grandes dificultades no reconto das células.Coa función de calibración de agregación, Countstar pode realizar un cálculo de estimulación das agregacións para garantir un reconto preciso de células e obter a taxa de agregación e o histograma de agregación, proporcionando así unha base para que os experimentadores xulguen o estado das células.
Seguimento do crecemento celular
Figura 4 Curva de crecemento celular.
A curva de crecemento celular é un método común para medir o crecemento absoluto do número de células, un indicador importante para determinar a concentración celular e un dos parámetros básicos para o cultivo das propiedades biolóxicas básicas das células.Para describir con precisión o cambio dinámico no número de células ao longo de todo o proceso, a curva de crecemento típica pódese dividir en 4 partes: período de incubación con crecemento lento;fase de crecemento exponencial con gran pendente, fase meseta e período de declive.A curva de crecemento celular pódese obter representando o número de células vivas (10.000/mL) en función do tempo de cultivo (h ou d).
Medición da concentración celular e da viabilidade
Figura 1 As imaxes foron capturadas por Countstar BioTech mentres as células (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 e MDCK) en suspensión foron tinguidas por Trypan Blue respectivamente.
Countstar é aplicable a células cun diámetro entre 5-180um, como células de mamíferos, células de insectos e algúns planctos.
Medición do tamaño das células
Figura 2 Medición do tamaño das células CHO antes e despois da transfección do plásmido.
A. Imaxes da suspensión de células CHO tinguidas con azul de tripano antes e despois da transfección do plásmido.
B. Comparación do histograma do tamaño das células CHO antes e despois da transfección do plásmido.
O cambio de tamaño da célula é unha característica clave e adoita medirse na investigación celular.Normalmente medirase nestes experimentos: transfección celular, proba de drogas e ensaios de activación celular.Countstar proporciona datos estatísticos de morfoloxía, como o tamaño das células, nun prazo de 20 segundos.
O contador de células automatizado de Countstar pode dar os datos morfolóxicos das células, incluíndo histogramas de circularidade e diámetro.
