કોષની સાંદ્રતા, કાર્યક્ષમતા અને કોષનું કદ અને એકત્રીકરણ માપન

સસ્પેન્શનમાં કોષો ધરાવતો નમૂનો ટ્રિપૅન વાદળી રંગ સાથે ભળી રહ્યો છે, ત્યારબાદ કાઉન્ટસ્ટાર ઓટોમેટેડ સેલ કાઉન્ટર દ્વારા વિશ્લેષણ કરાયેલ કાઉન્ટસ્ટાર ચેમ્બર સ્લાઇડમાં દોરવામાં આવે છે.ક્લાસિક ટ્રાયપન બ્લુ સેલ કાઉન્ટિંગ સિદ્ધાંત પર આધારિત, કાઉન્ટસ્ટારના સાધનો અદ્યતન ઓપ્ટિકલ ઇમેજિંગ ટેક્નોલોજી, બુદ્ધિશાળી ઇમેજ રેકગ્નિશન ટેક્નોલોજી અને શક્તિશાળી સૉફ્ટવેર અલ્ગોરિધમ્સને માત્ર કોષની સાંદ્રતા અને સદ્ધરતા પ્રદાન કરવા માટે જ નહીં, પરંતુ કોષની સાંદ્રતા, સદ્ધરતા, એકત્રીકરણ દર, ગોળાકારતાની માહિતી પણ પ્રદાન કરે છે. , અને માત્ર એક રન સાથે વ્યાસનું વિતરણ.

એકીકૃત કોષ વિશ્લેષણ

આકૃતિ 3 એકીકૃત કોષોની ગણતરી.

A. સેલ નમૂનાની છબી;
B. કાઉન્ટસ્ટાર બાયોટેક સોફ્ટવેર દ્વારા ઓળખ ચિહ્ન સાથે સેલ સેમ્પલની છબી.(ગ્રીન સર્કલ: લાઇવ સેલ, યલો સર્કલ: ડેડ સેલ, રેડ સર્કલ: એગ્રીગેટેડ સેલ).
C. એકીકૃત હિસ્ટોગ્રામ

કેટલાક પ્રાથમિક કોષો અથવા ઉપસંસ્કૃતિના કોષો જ્યારે નબળી સંસ્કૃતિની સ્થિતિ અથવા અતિશય પાચનક્રિયા કરે છે ત્યારે એકંદર થવાની સંભાવના હોય છે, આમ કોષોની ગણતરીમાં મોટી મુશ્કેલી ઊભી થાય છે.એકત્રીકરણ કેલિબ્રેશન ફંક્શન સાથે, કાઉન્ટસ્ટાર ચોક્કસ કોષની ગણતરીને સુનિશ્ચિત કરવા અને એકત્રીકરણ દર અને એકત્રીકરણ હિસ્ટોગ્રામ મેળવવા માટે એકત્રીકરણની ઉત્તેજના ગણતરીને અનુભવી શકે છે, આમ કોષોની સ્થિતિનો ન્યાય કરવા માટે પ્રયોગકર્તાઓને આધાર પૂરો પાડે છે.

સેલ ગ્રોઇંગનું મોનિટરિંગ

આકૃતિ 4 સેલ ગ્રો કર્વ.

કોષ વૃદ્ધિ વળાંક એ કોષ સંખ્યાની સંપૂર્ણ વૃદ્ધિને માપવા માટેની એક સામાન્ય પદ્ધતિ છે, જે કોષની સાંદ્રતા નક્કી કરવા માટે એક મહત્વપૂર્ણ સૂચક છે અને કોષોના મૂળભૂત જૈવિક ગુણધર્મોના સંવર્ધન માટેના મૂળભૂત પરિમાણોમાંનું એક છે.સમગ્ર પ્રક્રિયા દરમિયાન કોષોની સંખ્યામાં ગતિશીલ ફેરફારનું ચોક્કસ વર્ણન કરવા માટે, લાક્ષણિક વૃદ્ધિ વળાંકને 4 ભાગોમાં વિભાજિત કરી શકાય છે: ધીમી વૃદ્ધિ સાથે સેવનનો સમયગાળો;મોટા ઢોળાવ સાથે ઘાતાંકીય વૃદ્ધિનો તબક્કો, ઉચ્ચપ્રદેશનો તબક્કો અને ઘટાડાનો સમયગાળો.કોષ વૃદ્ધિ વળાંક સંસ્કૃતિ સમય (h અથવા d) સામે જીવંત કોષોની સંખ્યા (10'000/mL) રચીને મેળવી શકાય છે.

સેલ એકાગ્રતા અને સદ્ધરતા માપવા

આકૃતિ 1 કાઉન્ટસ્ટાર બાયોટેક દ્વારા સસ્પેન્શનમાં કોષો (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9, અને MDCK) અનુક્રમે ટ્રાયપન બ્લુ દ્વારા સ્ટેનિંગ તરીકે છબીઓ લેવામાં આવી હતી.

કાઉન્ટસ્ટાર 5-180um વચ્ચેના વ્યાસવાળા કોષોને લાગુ પડે છે, જેમ કે સસ્તન કોષ, જંતુ કોષ અને કેટલાક પ્લાન્કટોન.

સેલ સાઈઝ મેઝરમેન્ટ

આકૃતિ 2 પ્લાઝમિડ ટ્રાન્સફેક્શન પહેલાં અને પછી CHO કોષોનું કોષનું કદ માપન.

A. પ્લાઝમિડ ટ્રાન્સફેક્શન પહેલાં અને પછી ટ્રિપૅન બ્લુ દ્વારા સ્ટેન કરાયેલ CHO સેલ સસ્પેન્શનની છબીઓ.
B. પ્લાઝમિડ ટ્રાન્સફેક્શન પહેલા અને પછી CHO સેલના કદના હિસ્ટોગ્રામની સરખામણી.

કોષના કદમાં ફેરફાર એ મુખ્ય લક્ષણ છે અને સામાન્ય રીતે કોષ સંશોધનમાં માપવામાં આવે છે.સામાન્ય રીતે તે આ પ્રયોગોમાં માપવામાં આવશે: સેલ ટ્રાન્સફેક્શન, ડ્રગ ટેસ્ટ અને સેલ એક્ટિવેશન એસેસ.કાઉન્ટસ્ટાર આંકડાકીય મોર્ફોલોજી ડેટા પ્રદાન કરે છે, જેમ કે કોષોના કદ, 20ની અંદર.

કાઉન્ટસ્ટાર ઓટોમેટેડ સેલ કાઉન્ટર કોષોના મોર્ફોલોજિકલ ડેટા આપી શકે છે, જેમાં પરિપત્ર અને વ્યાસ હિસ્ટોગ્રામનો સમાવેશ થાય છે.