AOPI ડ્યુઅલ-ફ્લોરેસેસ કાઉન્ટિંગ એ કોષની સાંદ્રતા અને સદ્ધરતા શોધવા માટે વપરાતો એસે પ્રકાર છે.સોલ્યુશન એક્રિડાઇન ઓરેન્જ (લીલો-ફ્લોરોસન્ટ ન્યુક્લીક એસિડ સ્ટેન) અને પ્રોપીડિયમ આયોડાઇડ (લાલ-ફ્લોરોસન્ટ ન્યુક્લીક એસિડ સ્ટેન) નું મિશ્રણ છે.પ્રોપિડીયમ આયોડાઇડ (PI) એ પટલનો બાકાત રંગ છે જે માત્ર ચેડા થયેલા પટલવાળા કોષોમાં પ્રવેશે છે, જ્યારે એક્રીડીન નારંગી વસ્તીના તમામ કોષોમાં પ્રવેશ કરવામાં સક્ષમ છે.જ્યારે બંને રંગો ન્યુક્લિયસમાં હાજર હોય છે, ત્યારે પ્રોપિડિયમ આયોડાઈડ ફ્લોરોસેન્સ રેઝોનન્સ એનર્જી ટ્રાન્સફર (FRET) દ્વારા એક્રીડિન ઓરેન્જ ફ્લોરોસેન્સમાં ઘટાડો કરે છે.પરિણામે, અખંડ પટલ સાથેના ન્યુક્લિએટેડ કોષો ફ્લોરોસન્ટ લીલા રંગના થાય છે અને તેને જીવંત તરીકે ગણવામાં આવે છે, જ્યારે ચેડા થયેલ પટલ સાથેના ન્યુક્લિએટેડ કોષો માત્ર ફ્લોરોસન્ટ લાલ રંગના જ ડાઘા કરે છે અને Countstar® FL સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરતી વખતે મૃત તરીકે ગણવામાં આવે છે.બિન-ન્યુક્લિએટેડ સામગ્રી જેમ કે લાલ રક્ત કોશિકાઓ, પ્લેટલેટ્સ અને ભંગાર ફ્લોરોસીસ થતા નથી અને Countstar® FL સોફ્ટવેર દ્વારા તેની અવગણના કરવામાં આવે છે.
સ્ટેમ સેલ થેરાપીની પ્રક્રિયા
આકૃતિ 4 સેલ થેરાપીમાં ઉપયોગ માટે મેસેનકાઇમલ સ્ટેમ સેલ (MSCs) ની કાર્યક્ષમતા અને કોષની ગણતરીનું નિરીક્ષણ.
AO/PI અને Trypan Blue Asay દ્વારા MSC સદ્ધરતા નક્કી કરો
આકૃતિ 2. A. AO/PI અને Trypan Blue દ્વારા સ્ટેઇન્ડ MSC ની છબી;2. પરિવહન પહેલાં અને પછી AO/PI અને Trypan વાદળી પરિણામની સરખામણી.
સેલ રીફ્રેક્ટિવ ઇન્ડેક્સ બદલાય છે, ટ્રાયપન બ્લુ સ્ટેનિંગ એટલું સ્પષ્ટ ન હતું, પરિવહન પછી સધ્ધરતા નક્કી કરવી મુશ્કેલ છે.જ્યારે ડ્યુઅલ-કલર ફ્લોરોસેન્સ જીવંત અને મૃત ન્યુક્લિએટેડ કોશિકાઓના સ્ટેનિંગ માટે પરવાનગી આપે છે, કાટમાળ, પ્લેટલેટ્સ અને લાલ રક્ત કોશિકાઓની હાજરીમાં પણ સચોટ સધ્ધરતા પરિણામો ઉત્પન્ન કરે છે.
