પ્રાયોગિક પ્રોટોકોલ
સાયટોટોક્સિસિટી % ની ગણતરી નીચેના સમીકરણ દ્વારા કરવામાં આવે છે.
સાયટોટોક્સિસિટી % = (નિયંત્રણની જીવંત ગણતરીઓ - સારવારની જીવંત ગણતરીઓ) / નિયંત્રણની જીવંત ગણતરી × 100
લક્ષ્ય ગાંઠ કોષોને બિન-ઝેરી, બિન-કિરણોત્સર્ગી કેલ્સીન એએમ અથવા GFP સાથે ટ્રાન્સફેક્ટ સાથે લેબલ કરીને, અમે CAR-T કોષો દ્વારા ગાંઠ કોષોની હત્યાનું નિરીક્ષણ કરી શકીએ છીએ.જ્યારે જીવંત લક્ષ્ય કેન્સર કોષોને ગ્રીન કેલ્સીન AM અથવા GFP દ્વારા લેબલ કરવામાં આવશે, ત્યારે મૃત કોષો લીલા રંગને જાળવી શકતા નથી.Hoechst 33342 નો ઉપયોગ તમામ કોષો (ટી કોશિકાઓ અને ગાંઠ કોષો બંને) માટે થાય છે, વૈકલ્પિક રીતે, લક્ષ્ય ગાંઠ કોષોને મેમ્બ્રેન બાઉન્ડ કેલ્સીન AM સાથે ડાઘ કરી શકાય છે, PI નો ઉપયોગ મૃત કોષો (ટી કોશિકાઓ અને ગાંઠ કોષો બંને) પર ડાઘ માટે થાય છે.આ સ્ટેનિંગ વ્યૂહરચના વિવિધ કોષોના ભેદભાવ માટે પરવાનગી આપે છે.
E: K562 ના T રેશિયો આધારિત સાયટોટોક્સિસિટી
ઉદાહરણ Hoechst 33342, CFSE, PI ફ્લોરોસન્ટ ઇમેજ એ T = 3 કલાક પર K562 લક્ષ્ય કોષો છે
પરિણામી ફ્લોરોસન્ટ ઈમેજમાં E: T રેશિયો વધવાથી Hoechst+CFSE+PI+ લક્ષ્ય કોષોમાં વધારો જોવા મળ્યો
