AOPI डुअल-फ्लोरोसेस काउंटिंग सेल एकाग्रता और व्यवहार्यता का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाने वाला परख प्रकार है।समाधान एक्रिडीन नारंगी (हरा-फ्लोरोसेंट न्यूक्लिक एसिड दाग) और प्रोपीडियम आयोडाइड (लाल-फ्लोरोसेंट न्यूक्लिक एसिड दाग) का एक संयोजन है।प्रोपीडियम आयोडाइड (पीआई) एक झिल्ली अपवर्जन डाई है जो केवल समझौता झिल्ली वाली कोशिकाओं में प्रवेश करती है, जबकि एक्रिडीन ऑरेंज एक आबादी में सभी कोशिकाओं में प्रवेश करने में सक्षम है।जब दोनों रंग नाभिक में मौजूद होते हैं, तो प्रोपीडियम आयोडाइड फ्लोरेसेंस रेजोनेंस एनर्जी ट्रांसफर (एफआरईटी) द्वारा एक्रिडीन ऑरेंज फ्लोरोसेंस में कमी का कारण बनता है।नतीजतन, अक्षुण्ण झिल्लियों वाली न्यूक्लियेटेड कोशिकाएं फ्लोरोसेंट हरे रंग का दाग देती हैं और उन्हें जीवित के रूप में गिना जाता है, जबकि समझौता झिल्ली वाली न्यूक्लियेटेड कोशिकाएं केवल फ्लोरोसेंट लाल रंग की होती हैं और काउंटस्टार® एफएल सिस्टम का उपयोग करते समय उन्हें मृत के रूप में गिना जाता है।गैर-न्यूक्लेटेड सामग्री जैसे लाल रक्त कोशिकाएं, प्लेटलेट्स और मलबे फ्लोरोसिस नहीं करते हैं और काउंटस्टार® एफएल सॉफ्टवेयर द्वारा अनदेखा किया जाता है।
स्टेम सेल थेरेपी की प्रक्रिया
चित्रा 4 सेल थेरेपी में उपयोग के लिए मेसेनकाइमल स्टेम सेल (MSCs) की व्यवहार्यता और सेल काउंट की निगरानी।
एओ/पीआई और ट्रिपैन ब्लू परख द्वारा एमएससी व्यवहार्यता निर्धारित करें
चित्रा 2. एओ / पीआई और ट्रिपैन ब्लू द्वारा दागे गए एमएससी की ए छवि;2. परिवहन से पहले और बाद में एओ/पीआई और ट्रिपैन ब्लू परिणाम की तुलना।
सेल अपवर्तक सूचकांक बदलता है, ट्रिपैन ब्लू धुंधला इतना स्पष्ट नहीं था, परिवहन के बाद व्यवहार्यता निर्धारित करना मुश्किल है।जबकि दोहरे रंग का प्रतिदीप्ति जीवित और मृत नाभिक कोशिकाओं के धुंधला होने की अनुमति देता है, मलबे, प्लेटलेट्स और लाल रक्त कोशिकाओं की उपस्थिति में भी सटीक व्यवहार्यता परिणाम उत्पन्न करता है।
