Uzorak koji sadrži stanice u suspenziji miješa se s Trypan plavom bojom, a zatim se uvlači u Countstar Chamber Slide analiziran Countstar Automated Cell Counter.Temeljeni na klasičnom principu brojanja tripan plavih stanica, Countstarovi instrumenti integriraju naprednu tehnologiju optičkog snimanja, inteligentnu tehnologiju prepoznavanja slike i moćne softverske algoritme kako bi ne samo dali koncentraciju i održivost stanice, već i dali informacije o koncentraciji stanice, vitalnosti, stopi agregacije, zaobljenosti , i raspodjela promjera sa samo jednom vožnjom.
Agregirana stanična analiza
Slika 3. Brojanje agregiranih stanica.
A. Slika uzorka stanice;
B. Slika uzorka stanice s identifikacijskom oznakom softvera Countstar BioTech.(Zeleni krug: živa stanica, žuti krug: mrtva stanica, crveni krug: agregirana ćelija).
C. Agregirani histogram
Neke primarne stanice ili stanice subkulture sklone su agregiranju u lošem stanju kulture ili pretjeranoj probavi, što uzrokuje velike poteškoće u prebrojavanju stanica.Uz funkciju kalibracije agregacije, Countstar može realizirati stimulacijski izračun agregacija kako bi osigurao točno brojanje stanica i dobio stopu agregacije i histogram agregacije, pružajući tako osnovu eksperimentatorima za prosuđivanje stanja stanica.
Praćenje rasta stanica
Slika 4. krivulja rasta stanica.
Krivulja rasta stanica uobičajena je metoda za mjerenje apsolutnog rasta broja stanica, važan pokazatelj za određivanje koncentracije stanica i jedan od osnovnih parametara za kulturu osnovnih bioloških svojstava stanica.Kako bi se točno opisala dinamička promjena broja stanica tijekom cijelog procesa, tipična krivulja rasta može se podijeliti na 4 dijela: razdoblje inkubacije sa sporim rastom;faza eksponencijalnog rasta s velikim nagibom, faza platoa i razdoblje opadanja.Krivulja rasta stanica može se dobiti crtanjem broja živih stanica (10'000/mL) u odnosu na vrijeme kulture (h ili d).
Mjerenje koncentracije i vitalnosti stanica
Slika 1. Slike su snimljene Countstar BioTech-om jer su stanice (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 i MDCK) u suspenziji obojene Trypan Blue.
Countstar je primjenjiv na stanice promjera između 5-180 um, poput stanica sisavaca, stanica kukaca i nekih planktona.
Mjerenje veličine ćelije
Slika 2. Mjerenje veličine stanica CHO stanica prije i nakon transfekcije plazmidom.
A. Slike suspenzije CHO stanica obojene tripan plavim prije i poslije transfekcije plazmida.
B. Usporedba histograma veličine CHO stanica prije i nakon transfekcije plazmida.
Promjena veličine stanice ključna je značajka i obično se mjeri u istraživanju stanica.Obično će se mjeriti u ovim eksperimentima: transfekcija stanica, test na lijekove i testovi aktivacije stanica.Countstar pruža statističke podatke o morfologiji, kao što su veličine stanica, unutar 20s.
Countstar automatizirani brojač stanica može dati morfološke podatke stanica, uključujući histograme kružnosti i promjera.
