Dvostruka fluorescencija Viability (AO/PI), akridin naranča (AO) i propidij jodid (PI) su nuklearne nukleinske boje i boje koje vežu kiselinu.AO može prodrijeti kroz membranu i mrtvih i živih stanica i boji jezgru, stvarajući zelenu fluorescenciju.Nasuprot tome, PI može prodrijeti samo kroz membrane mrtvih stanica s jezgrom koje se raspadaju, stvarajući crvenu fluorescenciju.Tehnologija Countstar Rigela koja se temelji na slikama isključuje fragmente stanica, krhotine i čestice artefakata, kao i male događaje kao što su trombociti, što daje vrlo točne rezultate.Zaključno, Countstar Rigel sustav se može koristiti za svaki korak procesa proizvodnje ćelija.

Citotoksičnost posredovana T/NK stanicama, U nedavno odobrenoj FDA terapiji CAR-T stanicama, genetski modificirani T-limfociti specifično se vežu na ciljane stanice raka (T) i ubijaju ih.Countstar Rigel analizatori mogu analizirati ovaj potpuni proces citotoksičnosti posredovane T/NK stanicama.

Studije citotoksičnosti provode se označavanjem ciljnih stanica raka s CFSE ili njihovim transfekcijom s GFP.Hoechst 33342 može se koristiti za bojenje svih stanica (i T stanica i tumorskih stanica).Alternativno, ciljne tumorske stanice mogu se obojati CFSE.Propidijev jodid (PI) koristi se za bojenje mrtvih stanica (i T stanica i tumorskih stanica).Korištenjem ove strategije bojenja može se postići diskriminacija između različitih stanica.

Učinkovitost GFP transfekcije, U molekularnoj genetici, različitim modelnim organizmima i staničnoj biologiji, GFP gen se često koristi kao reporter za studije ekspresije.Trenutno znanstvenici obično koriste fluorescentne mikroskope ili protočne citometre za analizu učinkovitosti transfekcije stanica sisavaca.No rukovanje složenom tehnologijom naprednog protočnog citometra zahtijeva iskusnog i visoko kvalificiranog operatera.Countstar Rigel korisnicima omogućuje jednostavnu i preciznu provedbu analize učinkovitosti transfekcije bez troškova rada i održavanja povezanih s tradicionalnom protočnom citometrijom.

Apoptoza stanica, Napredak stanične apoptoze može se pratiti korištenjem FITC konjugiranog Aneksina-V u kombinaciji sa 7-ADD.Ostaci fosfatidilserina (PS) normalno se nalaze na unutarnjoj strani plazma membrane zdravih stanica.Tijekom rane apoptoze, integritet membrane se gubi i PS će se prenijeti na vanjsku stranu stanične membrane.Aneksin V ima jak afinitet prema PS i stoga je idealan marker za rane apoptotske stanice.

Stanični ciklus, tijekom stanične diobe, stanice sadrže povećane količine DNK.Obilježeno PI, povećanje intenziteta fluorescencije izravno je proporcionalno nakupljanju DNA.Razlike u intenzitetu fluorescencije pojedinačnih stanica pokazatelji su stvarnog statusa staničnog ciklusa MCF 7 stanice su tretirane s 4 μM nokodazola kako bi se te stanice zaustavile u različitim fazama njihovog staničnog ciklusa.Slike svijetlog polja dobivene tijekom ovog testnog scenarija omogućuju nam da identificiramo svaku pojedinačnu ćeliju.PI fluorescentni kanal Countstar Rigela identificira DNA signale pojedinačnih stanica čak i u agregatima.Detaljna analiza intenziteta fluorescencije može se provesti pomoću FCS.

Fenotipizacija CD markera, Countstar Rigel modeli nude brži, jednostavniji i osjetljiviji pristup učinkovitijoj imunološkoj fenotipizaciji stanica.Uz slike visoke razlučivosti i moćne mogućnosti integrirane analize podataka, Countstar Rigel omogućuje korisnicima postizanje dosljedno pouzdanih rezultata bez potrebe za opsežnim složenim postavkama kontrole i prilagodbama kompenzacije fluorescencije.

Diferencijacija stanica ubojice izazvanog citokinom (CIK) pokazuje izvanrednu kvalitetu performansi Countstar Rigel analizatora u izravnoj usporedbi s protočnim citometrima visoke klase.PBMC miša u kulturi obojeni su s CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE i CD56-PE i inducirani interleukinom (IL) 6. Zatim su analizirani istovremeno s Countstar® Rigelom i protočnom citometrijom.U ovom testu, CD3-CD4, CD3-CD8 i CD3-CD56 podijeljeni su u tri skupine, kako bi se odredio udio različitih staničnih subpopulacija.

Detekcija degeneriranih stanica imunofluorescencijom, monoklonska antitijela koja proizvode stanične linije će izgubiti neke pozitivne klonove tijekom stanične proliferacije i prolaska zbog degradacije ili genetskih mutacija.Veći gubitak značajno će utjecati na produktivnost proizvodnog procesa.Praćenje razgradnje igra važnu ulogu u kontroli procesa kako bi se prinos protutijela pomaknuo na optimalno.

Većina antitijela proizvedenih u industriji BioPharma može se detektirati imunofluorescentnim označavanjem i kvantitativno analizirati pomoću serije Countstar Rigel.Slike svijetlog polja i kanala fluorescencije u nastavku jasno pokazuju one klonove koji su izgubili svojstvo da proizvode željena antitijela.Detaljnija analiza softverom DeNovo FCS Express Image potvrđuje da 86,35 % svih stanica ekspresira imunoglobuline, a samo 3,34 % je jasno negativno.

Trypan (plavo napisano velikim slovom B) Brojanje stanica, bojanje Trypan plavom i dalje se koristi u većini laboratorija stanične kulture.

Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp može se instalirati na sve Countstar Rigel modele.Naši zaštićeni algoritmi za prepoznavanje slika analiziraju više od 20 parametara kako bi klasificirali svaki otkriveni objekt.

QC za pohranu u ćelijskoj liniji, u skladištu stanica, sofisticirani koncept upravljanja kvalitetom osigurava sigurno, učinkovito praćenje svih staničnih proizvoda.To jamči stabilnu kvalitetu stanica kriokonzerviranih, kriokonzerviranih za eksperimente, razvoj procesa i proizvodnju.

Countstar Rigel dobiva slike visoke razlučivosti, analizirajući različite morfološke karakteristike staničnih objekata kao što su promjer, oblik i sklonost agregaciji.Slike različitih koraka procesa mogu se lako usporediti jedna s drugom.Tako se varijacije u obliku i agregaciji mogu lako otkriti izbjegavanjem subjektivnih ljudskih mjerenja.Baza podataka Countstar Rigel ima sofisticirani sustav upravljanja za pohranu i dohvat slika i podataka.