Značajke proizvoda
Inovativna tehnologija optičkog množenja
Jedinstvena tehnologija zumiranja omogućuje korisnicima analizu stanica u širokom rasponu promjera
Kada koristi predloške BioApp svijetlog polja u Countstar Miri, nova tehnologija zumiranja omogućuje operateru da točno identificira stanične objekte unutar raspona promjera od 1,0 µm do 180,0 µm.Stečene slike prikazuju čak i detalje pojedinačnih ćelija.Time se širi raspon primjena čak i na stanične objekte, koji se u prošlosti nisu mogli precizno analizirati.

Primjeri tipičnih staničnih linija u odnosu na moguća povećanja od 5x, 6,6x i 8x |
Povećanje Raspon promjera | 5x | 6,6x | 8x |
>10 µm | 5-10 µm | 1-5 µm |
Brojanje | ✓ | ✓ | ✓ |
Vabilnost | ✓ | ✓ | ✓ |
Vrsta ćelije | - MCF7
- HEK293
- CHO
- MSC
- RAW264.7
| - Imunološka stanica
- Pivski kvasac
- Embrijske stanice zebrice
| - Pichia Pastoris
- Chlorella vulgaris (FACHB-8)
- Escherichia
|
Algoritmi za analizu slike temeljeni na progresivnoj umjetnoj inteligenciji
Countstar Mira FL koristi prednosti umjetne inteligencije za razvoj algoritama za samoučenje.Oni su u stanju identificirati i analizirati više karakteristika stanica.Integracija parametara oblika stanice omogućuje vrlo preciznu i reproducibilnu analizu statusa staničnog ciklusa i/ili daje podatke o korelaciji između promjene stanične morfologije, formiranja staničnih skupina (agregata, malih sferoida) i uvjeta koji utječu.
Rezultati označavanja mezenhimalnih matičnih stanica nepravilnog oblika (MSC; 5x povećanje) u proliferirajućoj kulturi

- Zeleni krugovi označavaju žive stanice
- Crveni krugovi označavaju mrtve stanice
- Bijeli krugovi agregiranih stanica
RAW264.7 stanična linija je mala i lako se skuplja.Algoritam Countstar AI može identificirati stanice u nakupinama i prebrojati

- Zeleni krugovi označavaju žive stanice
- Crveni krugovi označavaju mrtve stanice
- Bijeli krugovi agregiranih stanica
Neujednačena veličina embrionalnih stanica zebrice (6,6X povećanje

- Zeleni krugovi označavaju žive stanice
- Crveni krugovi označavaju mrtve stanice
- Bijeli krugovi agregiranih stanica
Dizajn intuitivnog grafičkog korisničkog sučelja (GUI).
Jasno strukturirano GUI omogućuje učinkovito i udobno izvođenje eksperimenta
- Opsežna biblioteka s unaprijed postavljenim tipovima stanica i BioApps (protokoli predložaka za analizu).Samo jedan klik na BioApp i test može započeti.
- GUI jednostavan za korištenje olakšava prebacivanje između različitih opcija izbornika i jamči ugodno iskustvo testiranja
- Jasni strukturirani moduli izbornika podržavaju korisnika u svakodnevnoj rutini testiranja
Odaberite BioApp, unesite ID uzorka i pokrenite analizu

128 GB internog kapaciteta za pohranu podataka, dovoljno za pohranu pribl.50.000 rezultata analize u Countstar (R) Mira.Za brzi pristup, željeni podaci mogu se odabrati raznim opcijama pretraživanja.

Korisna značajka za uštedu vremena je povratni kalkulator razrjeđivanja.Isporučit će točne količine razrjeđivača i izvornog uzorka stanica, nakon što se unese konačna koncentracija stanica i ciljni volumen.To čini prolaz stanica u njihove subkulture ugodnim.

Višestruke značajke aplikacije
Značajke analize Countstar Mira podupiru korisnika u razumijevanju dinamičkih promjena unutar stanične kulture i pomažu optimizirati uvjete rasta.
Napredni softver za prepoznavanje slika zasnovan na umjetnoj inteligenciji Countstar Mira sposoban je isporučiti više parametara.Osim standardnih rezultata koncentracije stanica i statusa vitalnosti, distribucija veličine stanica, moguće stvaranje staničnih nakupina, relativni intenzitet fluorescencije svake pojedinačne stanice, oblik krivulje rasta i njihov vanjski morfološki faktor važni su parametri za procjenu stvarne stanje stanične kulture.Automatski generirani grafikoni krivulja rasta, distribucije promjera i histograma intenziteta fluorescencije, analiza pojedinačnih stanica unutar agregata i određivanje parametra kompaktnosti stanica olakšavaju korisniku bolje razumijevanje dinamičkih procesa unutar ispitivane stanične kulture od početka do završetka procesa.
Histogram

Histogram raspodjele relativnog intenziteta fluorescencije (RFI).

Histogram raspodjele promjera
Krivulja rasta

Testna slika(e) i rezultati

Dijagram krivulje rasta
Primjena proizvoda
AO/PI testovi gustoće i vitalnosti stanica dvostruke fluorescencije
Metoda dvostruke fluorescencije AO/PI bojenja temelji se na principu da se obje boje, akridin naranča (AO) i propidij jodid (PI), interkaliraju između nukleinskih kiselina kromosoma u jezgri stanice.Dok je AO sposoban prodrijeti kroz netaknute membrane jezgre u bilo kojem trenutku i obojati DNK, PI može proći samo ugroženu membranu jezgre umiruće (mrtve) stanice.Akumulirani AO u jezgri stanice emitira zeleno svjetlo na maksimalno 525 nm, ako je uzbuđen na 480 nm, PI odašilje crveno svjetlo sa svojom amplitudom na 615 nm, kada je uzbuđen na 525 nm.Efekat FRET (Foerster Resonance Energy Transfer) jamči da se emitirani signal AO na 525 nm apsorbira u prisutnosti PI boje kako bi se izbjegla dvostruka emisija svjetlosti i prelijevanje.Ova posebna kombinacija boja AO/PI omogućuje filtriranje stanica koje sadrže jezgru u prisutnosti akariona poput eritrocita.

Podaci Countstar Mira FL pokazali su dobru linearnost za gradijent razrjeđenja stanica HEK293

Analiza učinkovitosti GFP/RFP transfekcije
Učinkovitost transfekcije važan je pokazatelj u razvoju i optimizaciji stanične linije, u podešavanju virusnih vektora i za praćenje prinosa proizvoda u Biopharma procesima.Postao je najčešće uspostavljeni test za brzo i pouzdano određivanje sadržaja ciljnog proteina unutar stanice.U različitim pristupima genske terapije, nezamjenjiv je alat za kontrolu učinkovitosti transfekcije željene genetske modifikacije.
Countstar Mira ne samo da daje precizne i točne rezultate, u usporedbi s protočnom citometrijom, osim toga analizator pruža slike kao dokaz dokaza.Osim toga, značajno pojednostavljuje i ubrzava analizu radi racionalizacije razvoja razvojnog i proizvodnog procesa.
Serija slika, koju je nabavio Countstar(R) Mira, pokazuje povećanje razine učinkovitosti transfekcije (s lijeva na desno) genetski modificiranih stanica (HEK 293 stanična linija; izražavanje GFP-a u različitim koncentracijama)

Rezultati komparativnih mjerenja, izvršenih s B/C CytoFLEX-om, koji potvrđuju podatke o učinkovitosti GFP transfekcije modificiranih stanica HEK 293, analizirane u Countstar Mira

Široko prihvaćena analiza održivosti Trypan Blue
Test diskriminacije održivosti Trypan Blue još uvijek je jedna od najčešće korištenih i najpouzdanijih metoda za određivanje broja (umirućih) mrtvih stanica unutar suspenzije stanične kulture.Održive stanice s netaknutom strukturom vanjske stanične membrane će odbiti Trypan Blue od prožimanja membrane.U slučaju da stanična membrana propušta zbog napredovanja njezine stanične smrti, Trypan Blue može proći membransku barijeru, nakuplja se u staničnoj plazmi i boji stanicu u plavo.Ova optička razlika može se koristiti za razlikovanje besprijekorno živih stanica od mrtvih stanica pomoću algoritama za prepoznavanje slike Countstar Mira FL.
- Slike tri stanične linije obojene Trypan Blue-om, snimljene u Countstar (R) Mira FL u načinu svijetlog polja.

- Rezultati gradijenta razrjeđenja serije HEK 293
