Analiza imuno-fenotipizacije tipičan je eksperiment koji se izvodi u područjima istraživanja vezanih uz stanice za dijagnosticiranje različitih bolesti (autoimuna bolest, bolest imunodeficijencije, dijagnoza tumora, hemostaza, alergijske bolesti i mnoge druge) i patologije bolesti.Također se koristi za ispitivanje kvalitete stanica u različitim istraživanjima staničnih bolesti.Protočna citometrija i fluorescentni mikroskop rutinske su metode analize u institutima za istraživanje staničnih bolesti koje se koriste za imuno-fenotipizaciju.Ali ove metode analize mogu pružiti samo slike ili nizove podataka, što možda neće zadovoljiti stroge zahtjeve za odobrenje regulatornih tijela.
M Dominici el, Citoterapija (2006) Vol.8, br. 4, 315-317
Identifikacija imuno-fenotipa AdMSC-a
Imunofenotip AdMSC je određen Countstar FL, AdMSC su inkubirani s različitim protutijelima (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 i HLADR).Procedura primjene boje signala stvorena je postavljanjem zelenog kanala na sliku PE fluorescencije, plus svijetlo polje.Referentna segmentacija slike svijetlog polja primijenjena je kao maska za uzorkovanje PE fluorescentnog signala.Prikazani su rezultati CD105 (slika 1).
Slika 1. Identifikacija imuno-fenotipa AdMSC-a.A. Svjetlo polje i fluorescentna slika AdMSC-a;B. Detekcija CD markera AdMSC-a od strane Countstar FL
Kontrola kvalitete MSC-a – potvrđivanje rezultata za svaku pojedinačnu ćeliju
Slika 2 A: Rezultati Countstar FL prikazani su u FCS express 5plus, određujući pozitivan postotak CD105, i preglednu tablicu pojedinačnih ćelija.B: Prilagođeno gajting na desnoj strani, slike tablice s pojedinačnim ćelijama prikazuju one stanice s visokom ekspresijom CD105.C: Prilagođeno gajting na lijevoj strani, slike pojedinačnih stanica u tablici pokazuju one stanice s niskom ekspresijom CD105.
Fenotipske promjene tijekom transporta
Slika 3. A: Kvantitativna analiza pozitivnog postotka CD105 u različitim uzorcima pomoću softvera FCS express 5 plus.B: Visokokvalitetne slike pružaju dodatne morfološke informacije.C: Validirani rezultati prema sličicama svake pojedinačne ćelije, FCS softverski alati podijelili su ćelije u različite
