A szuszpenzióban sejteket tartalmazó mintát tripánkék festékkel keverjük össze, majd a Countstar Automated Cell Counter által elemzett Countstar Chamber Slide-be húzzuk.A klasszikus tripánkék sejtszámlálási elv alapján a Countstar műszerei fejlett optikai képalkotási technológiát, intelligens képfelismerő technológiát és hatékony szoftveralgoritmusokat integrálnak, hogy ne csak a sejtkoncentrációt és életképességet biztosítsák, hanem a sejtkoncentrációról, életképességről, aggregációs rátáról, kerekségről is információt adnak. , és az átmérő eloszlása egyetlen futással.
Aggregált sejtelemzés
3. ábra Aggregált sejtek számlálása.
A. A sejtminta képe;
B. A sejtminta képe azonosító jellel a Countstar BioTech szoftvertől.(Zöld kör: élő sejt, sárga kör: halott sejt, piros kör: összesített sejt).
C. Összesített hisztogram
Egyes primer sejtek vagy szubkultúrás sejtek hajlamosak aggregálódni rossz tenyésztési állapot vagy túlzott emésztés esetén, ami nagy nehézséget okoz a sejtek számlálásában.Az aggregációs kalibrációs funkcióval a Countstar megvalósíthatja az aggregációk stimulációs számítását, hogy biztosítsa a pontos sejtszámlálást, és megkapja az aggregációs rátát és az aggregációs hisztogramot, így biztosítva a kísérletezők számára a sejtek állapotának megítélését.
A sejtnövekedés monitorozása
4. ábra Sejtnövekedési görbe.
A sejtnövekedési görbe egy elterjedt módszer a sejtszám abszolút növekedésének mérésére, a sejtkoncentráció meghatározásának fontos mutatója, valamint a sejtek alapvető biológiai tulajdonságainak tenyésztésének egyik alapvető paramétere.Annak érdekében, hogy pontosan leírjuk a sejtszám dinamikus változását a teljes folyamat során, a tipikus növekedési görbe 4 részre osztható: inkubációs időszak lassú növekedéssel;exponenciális növekedési szakasz nagy meredekséggel, fennsík szakasz és hanyatlási periódus.A sejtnövekedési görbét úgy kaphatjuk meg, hogy az élő sejtek számát (10 000/ml) a tenyésztési idő függvényében ábrázoljuk (h vagy d).
Sejtkoncentráció és életképesség mérése
1. ábra A képeket a Countstar BioTech rögzítette, miközben a sejteket (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 és MDCK) szuszpenzióban Trypan Blue-val megfestették.
A Countstar alkalmazható 5-180 um közötti átmérőjű sejteknél, például emlőssejteknél, rovarsejteknél és néhány planktonnál.
Sejtméret mérése
2. ábra CHO sejtek sejtméretének mérése a plazmid transzfekció előtt és után.
A. Tripánkékkel festett CHO-sejtek szuszpenziójának képei a plazmid transzfekció előtt és után.
B. A CHO sejtméret hisztogramjának összehasonlítása a plazmid transzfekció előtt és után.
A sejtméret változása kulcsfontosságú jellemző, és általában mérik a sejtkutatásban.Általában ezekben a kísérletekben mérik: sejttranszfekció, gyógyszerteszt és sejtaktivációs vizsgálatok.A Countstar 20 másodpercen belül statisztikai morfológiai adatokat szolgáltat, például a sejtek méretét.
A Countstar automatizált sejtszámláló képes megadni a sejtek morfológiai adatait, beleértve a körkörös és átmérő hisztogramokat.
