AOPI Dual-fluoresces counting-ը վերլուծության տեսակն է, որն օգտագործվում է բջիջների կոնցենտրացիան և կենսունակությունը հայտնաբերելու համար:Լուծումը ակրիդին նարնջի (կանաչ-ֆլուորեսցենտ նուկլեինաթթվի բիծ) և պրոպիդիում յոդիդի (կարմիր-լյումինեսցենտ նուկլեինաթթվի բիծ) համակցություն է:Պրոպիդիումի յոդիդը (PI) մեմբրանի բացառող ներկ է, որը մտնում է միայն վնասված թաղանթներով բջիջներ, մինչդեռ ակրիդին նարնջագույնը կարողանում է ներթափանցել պոպուլյացիայի բոլոր բջիջները:Երբ երկու ներկերն էլ առկա են միջուկում, պրոպիդիումի յոդիդը հանգեցնում է ակրիդինային նարնջի ֆլուորեսցենտության նվազեցմանը ֆլյուորեսցենտային ռեզոնանսային էներգիայի փոխանցման (FRET) միջոցով:Արդյունքում, անձեռնմխելի թաղանթներով միջուկավորված բջիջները ներկում են լյումինեսցենտ կանաչ և համարվում են կենդանի, մինչդեռ վնասված թաղանթներով միջուկավորված բջիջները ներկում են միայն լյումինեսցենտ կարմիր և համարվում են մեռած՝ Countstar® FL համակարգը օգտագործելիս:Ոչ միջուկային նյութերը, ինչպիսիք են արյան կարմիր բջիջները, թրոմբոցիտները և բեկորները, չեն լուսանում և անտեսվում են Countstar® FL ծրագրաշարի կողմից:
Ցողունային բջիջներով թերապիայի գործընթացը
Գծապատկեր 4 Մեզենխիմալ ցողունային բջիջների (MSCs) կենսունակության և բջիջների քանակի մոնիտորինգ՝ բջջային թերապիաներում օգտագործելու համար:
Որոշեք MSC-ի կենսունակությունը AO/PI-ով և Trypan Blue-ով
Նկար 2. A. MSC-ի պատկերը ներկված AO/PI-ով և Trypan Blue-ով;2. AO/PI-ի և Trypan blue արդյունքի համեմատությունը տրանսպորտից առաջ և հետո:
Բջիջների բեկման ինդեքսը փոխվում է, Trypan Blue-ի ներկումն այնքան էլ ակնհայտ չէր, դժվար է որոշել կենսունակությունը տրանսպորտից հետո:Մինչ երկգույն ֆլուորեսցենտը թույլ է տալիս ներկել կենդանի և մեռած միջուկային բջիջները, ճշգրիտ կենսունակության արդյունք է տալիս նույնիսկ բեկորների, թրոմբոցիտների և արյան կարմիր բջիջների առկայության դեպքում:
