Nyochaa leukocytes n'ọbara dum bụ nyocha a na-eme kwa ụbọchị na ụlọ nyocha ụlọ ọgwụ ma ọ bụ ụlọ akụ ọbara.Ntinye uche na ịdị ndụ nke leukocytes bụ ihe ndekọ dị mkpa dị ka njikwa mma nke nchekwa ọbara.Ewezuga leukocyte, ọbara dum nwere ọnụ ọgụgụ dị ukwuu nke platelet, mkpụrụ ndụ ọbara uhie, ma ọ bụ irighiri ihe nke cellular, nke na-eme ka ọ ghara ikwe omume nyocha ọbara dum ozugbo n'okpuru microscope ma ọ bụ ọnụ ọgụgụ cell ubi na-egbuke egbuke.Ụzọ ndị a na-emekarị iji gụọ sel ọbara ọcha gụnyere usoro RBC lysis, nke na-ewe oge.
AOPI Dual-fluoresces agụta bụ ụdị nyocha eji achọpụta mkpokọta cell na ịdị adị.Ihe ngwọta bụ nchikota nke acridine oroma (acha ndụ ndụ-fluorescent nucleic acid unyi) na propidium iodide (red-fluorescent nucleic acid ntụpọ).Propidium iodide (PI) bụ ụcha mwepu nke akpụkpọ ahụ nke na-abanye naanị n'ime sel nwere akpụkpọ ahụ mebiri emebi, ebe oroma acridine na-enwe ike ịbanye n'ime sel niile na ọnụ ọgụgụ mmadụ.Mgbe agbaji abụọ dị na nucleus, propidium iodide na-eme ka mbelata nke acridine oroma fluorescence site na fluorescence resonance energy transfer (FRET).N'ihi nke a, mkpụrụ ndụ nucleated nwere akpụkpọ ahụ na-adịghị emebi emebi na-acha akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ na-acha akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ, ebe a na-agụkwa ya dị ka ndụ, ebe sel ndị nwere nsogbu mebie na-acha uhie uhie na-acha uhie uhie na-agụkwa dị ka ndị nwụrụ anwụ mgbe ha na-eji usoro Countstar® Rigel.
Countstar Rigel bụ ihe ngwọta dị mma maka ọtụtụ nyocha njirimara ọnụ ọgụgụ sel dị mgbagwoju anya, na-enyere aka nyochaa mkpụrụ ndụ ọbara ọcha ngwa ngwa n'ime ọbara dum.
Usoro nnwale:
1. Were 20 µl nke ihe nlele ọbara wee gbanye ihe nlele ahụ na 180 µl nke PBS.
2. Tinye 12µl AO / PI ngwọta n'ime 12µl sample, jiri nwayọọ gwakọta ya na pipette;
3.Draw 20µl ngwakọta n'ime ụlọ slide;
4. Kwe ka sel ahụ nọrọ n'ime ụlọ maka gburugburu 1 nkeji;
5.Insect slide ahụ n'ime ngwá ọrụ Countstar FL;
6.Họrọ nyocha "AO / PI Viability", wee tinye NJ nlele maka nlele a.
7.Select Dilution ratio, Cell Ụdị, pịa 'Run' na-amalite ule.
Akpachara anya: AO na PI nwere ike ibute ọrịa carcinogen.A na-atụ aro ka onye na-ahụ maka ọrụ yikwasị ngwa nchedo onwe onye (PPE) ka ịzenarị akpụkpọ anụ na anya ozugbo.
Nsonaazụ:
1. Oyiyi Ubi Na-egbuke egbuke nke ọbara dum
N'ime onyonyo na-egbuke egbuke nke ọbara dum, a naghị ahụ WBC's n'etiti mkpụrụ ndụ ọbara uhie.(Foto nke 1)
Ọgụgụ 1 Onyonyo n'ọhịa na-egbuke egbuke nke ọbara dum.
2. Fluorescence Image nke ọbara dum
AO na PI agba bụ ma ntụpọ DNA na cell nucleus nke sel.Ya mere, platelet, mkpụrụ ndụ ọbara uhie, ma ọ bụ irighiri ihe nke cellular enweghị ike imetụta mkpokọta leukocytes na nsonaazụ viability.A na-ahụ anya leukocytes dị ndụ (Green) na leukocytes nwụrụ anwụ (Red) na foto fluorescence.(Foto nke 2)
Onyonyo 2 Fluorescence Onyonyo nke ọbara dum.(A).Onyonyo nke AO Channel;(B) Foto nke ọwa PI;(C) Jikọọ onyonyo nke AO na ọwa PI.
3. Ntinye uche na ike nke leukocytes
Akụrụngwa Countstar FL na-agụkọ mkpụrụ ndụ nke ngalaba atọ na-akpaghị aka wee gbakọọ uru nke ngụkọta ọnụ ọgụgụ cell WBC (1202), itinye uche (1.83 x 106 sel/ml), na % viability (82.04%).Enwere ike ibupu onyonyo na data niile n'ọbara dị mfe dị ka PDF, Oyiyi ma ọ bụ Excel maka nyocha ọzọ ma ọ bụ nchekwa data.
Ọgụgụ 3 nseta ihuenyo nke Countstar Rigel Software
