Un campione contenente cellule in sospensione viene miscelato con il colorante blu Trypan, quindi aspirato nel vetrino da camera Countstar analizzato da Countstar Automated Cell Counter.Basati sul classico principio di conteggio delle cellule del trypan blue, gli strumenti di Countstar integrano una tecnologia di imaging ottico avanzata, una tecnologia di riconoscimento intelligente delle immagini e potenti algoritmi software non solo per fornire la concentrazione e la vitalità cellulare, ma anche per fornire le informazioni sulla concentrazione cellulare, la vitalità, il tasso di aggregazione, la rotondità e distribuzione del diametro con una sola corsa.
Analisi cellulare aggregata
Figura 3 Conteggio delle celle aggregate.
A. Immagine del campione cellulare;
B. Immagine del campione cellulare con marchio di identificazione dal software Countstar BioTech.(Cerchio verde: cella viva, cerchio giallo: cella morta, cerchio rosso: cella aggregata).
C. Istogramma aggregato
Alcune cellule primarie o cellule di sottocoltura tendono ad aggregarsi in condizioni di scarsa coltura o digestione eccessiva, causando così grandi difficoltà nel conteggio delle cellule.Con la funzione di calibrazione dell'aggregazione, Countstar può realizzare un calcolo di stimolazione delle aggregazioni per garantire un conteggio cellulare accurato e ottenere la velocità di aggregazione e l'istogramma di aggregazione, fornendo così agli sperimentatori le basi per giudicare lo stato delle cellule.
Monitoraggio della crescita cellulare
Figura 4 Curva di crescita cellulare.
La curva di crescita cellulare è un metodo comune per misurare la crescita assoluta del numero cellulare, un indicatore importante per determinare la concentrazione cellulare e uno dei parametri di base per la coltura delle proprietà biologiche di base delle cellule.Per descrivere con precisione la variazione dinamica del numero di cellule durante l'intero processo, la tipica curva di crescita può essere suddivisa in 4 parti: periodo di incubazione con crescita lenta;fase di crescita esponenziale con ampia pendenza, fase di plateau e periodo di declino.La curva di crescita cellulare può essere ottenuta tracciando il numero di cellule viventi (10'000/mL) rispetto al tempo di coltura (h o d).
Misurazione della concentrazione cellulare e della vitalità
Figura 1 Le immagini sono state catturate da Countstar BioTech mentre le cellule (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 e MDCK) in sospensione sono state colorate rispettivamente con Trypan Blue.
Countstar è applicabile a cellule con diametro compreso tra 5 e 180 um, come cellule di mammiferi, cellule di insetti e alcuni plancton.
Misurazione delle dimensioni delle celle
Figura 2 Misurazione della dimensione cellulare delle cellule CHO prima e dopo la trasfezione del plasmide.
A. Immagini della sospensione di cellule CHO colorate con blu di trypan prima e dopo la trasfezione del plasmide.
B. Confronto dell'istogramma delle dimensioni delle cellule CHO prima e dopo la trasfezione del plasmide.
Il cambiamento delle dimensioni delle cellule è una caratteristica chiave ed è comunemente misurato nella ricerca cellulare.Normalmente sarà misurato in questi esperimenti: trasfezione cellulare, test antidroga e saggi di attivazione cellulare.Countstar fornisce dati statistici sulla morfologia, come le dimensioni delle celle, entro 20 secondi.
Il contatore di cellule automatizzato Countstar può fornire i dati morfologici delle cellule, inclusi gli istogrammi di circolarità e diametro.
