Le cellule staminali mesenchimali sono un sottoinsieme di cellule staminali pluripotenti che possono essere isolate dal mesoderma.Con le loro caratteristiche di rinnovamento dell'autoreplicazione e differenziazione multidirezionale, possiedono un alto potenziale per varie terapie in medicina.Le cellule staminali mesenchimali hanno un fenotipo immunitario unico e una capacità di regolazione immunitaria.Pertanto, le cellule staminali mesenchimali sono già ampiamente utilizzate nei trapianti di cellule staminali, nell'ingegneria dei tessuti e nei trapianti di organi.E oltre a queste applicazioni, sono utilizzati come strumento ideale nell'ingegneria dei tessuti come cellule seminatrici in una serie di esperimenti di ricerca clinica e di base.
Il Countstar Rigel può monitorare la concentrazione, la vitalità, l'analisi dell'apoptosi e le caratteristiche fenotipiche (e le loro modifiche) durante la produzione e la differenziazione di queste cellule staminali.Il Countstar Rigel ha anche il vantaggio di ottenere informazioni morfologiche aggiuntive, fornite dal campo luminoso permanente e dalle registrazioni di immagini basate sulla fluorescenza durante l'intero processo di monitoraggio della qualità cellulare.Il Countstar Rigel offre un metodo veloce, sofisticato e affidabile per il controllo della qualità delle cellule staminali.
Monitoraggio della fattibilità delle MSC in medicina rigenerativa
Figura 1 Monitoraggio della vitalità e della conta cellulare delle cellule staminali mesenchimali (MSC) per l'uso nelle terapie cellulari
La cellula staminale è uno dei trattamenti più promettenti nelle terapie cellulari rigenerative.Dalla raccolta delle MSC al trattamento, è importante mantenere un'elevata vitalità delle cellule staminali durante tutte le fasi della produzione di cellule staminali (Figura 1).Il contatore di cellule staminali di Countstar monitora la vitalità e la concentrazione delle cellule staminali per svolgere un ruolo fondamentale nel controllo di qualità.
Monitoraggio dei cambiamenti morfologici di MSC dopo il trasporto
Anche il diametro e l'aggregazione sono stati determinati da Countstar Rigel.Il diametro degli AdMSC è stato cambiato drasticamente dopo il trasporto rispetto a prima del trasporto.Il diametro prima del trasporto era di 19 µm, ma è aumentato a 21 µm dopo il trasporto.L'aggregazione prima del trasporto era del 20%, ma è aumentata al 25% dopo il trasporto.Dalle immagini catturate da Countstar Rigel, il fenotipo degli AdMSC è stato cambiato drasticamente dopo il trasporto.I risultati sono stati mostrati in Figura 3.
Identificazione di AdMSC nel fenotipo cellulare
Attualmente le procedure di prova di identificazione standard minime per l'assicurazione della qualità delle MSC monitorate sono elencate in una dichiarazione della Società internazionale per la terapia cellulare (ISCT), definita già nel 2006.
Rilevamento rapido dell'apoptosi nelle MSC con introduzione di annessina-V coniugata con FITC e 7-ADD
L'apoptosi cellulare può essere rilevata con l'annessina-V coniugata con FITC e 7-ADD.La PS si trova normalmente solo sul lembo intracellulare della membrana plasmatica nelle cellule sane, ma durante l'apoptosi precoce, l'asimmetria della membrana viene persa e la PS si trasloca nel lembo esterno.
Figura 6 Rilevamento dell'apoptosi nelle MSC da parte di Countstar Rigel
A. Ispezione visiva dell'immagine a fluorescenza del rilevamento dell'apoptosi nelle MSC
B. Grafici a dispersione dell'apoptosi nelle MSC di FCS express
C. Percentuale di popolazione cellulare basata sulla % di cellule normali, % apoptotiche e % necrotiche/apoptotiche in stadio molto avanzato.
