Applicazione di un citometro a immagine per migliorare lo sviluppo della linea cellulare per la produzione di prodotti biologici e rAAV

I farmaci biologici e le terapie geniche basate su AAV stanno guadagnando quote di mercato sempre maggiori per il trattamento delle malattie.Tuttavia, lo sviluppo di una linea cellulare di mammiferi robusta ed efficiente per la loro produzione è impegnativo e di solito richiede un'ampia caratterizzazione cellulare.Storicamente, in questi saggi cellulari viene utilizzato un citometro a flusso.Tuttavia, un citometro a flusso è relativamente costoso e richiede un'ampia formazione sia per il funzionamento che per la manutenzione.Recentemente, con un aumento delle capacità di calcolo e sensori di fotocamera di alta qualità, la citometria basata su immagini è stata innovata per fornire un'alternativa precisa ed economica per lo sviluppo del processo della linea cellulare.In questo lavoro, abbiamo descritto un flusso di lavoro di sviluppo di linee cellulari che incorpora un citometro basato su immagini, vale a dire il Countstar Rigel, per la valutazione dell'efficienza di trasfezione e la valutazione del pool stabile utilizzando cellule CHO e HEK293 che esprimono rispettivamente l'anticorpo e il vettore rAAV.Nei due casi studio abbiamo dimostrato:

1. Countstar Rigel ha fornito una precisione di rilevamento simile alla citometria a flusso.
2. La valutazione del pool basata su Countstar Rigel può aiutare a determinare il gruppo desiderabile per la clonazione unicellulare (SCC).
3. La piattaforma di sviluppo della linea cellulare incorporata Countstar Rigel ha raggiunto un titolo mAb di 2,5 g/L.

Abbiamo anche discusso la possibilità di utilizzare Countstar come un altro livello di un obiettivo di ottimizzazione basato su rAAV DoE.

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