ריכוז תאים, כדאיות ומדידת גודל תא וצבירה

דגימה המכילה תאים בהשעיה מתערבבת עם צבע טריפן כחול, ולאחר מכן נמשכת לתוך שקופית Countstar קאמרית מנותחת על ידי Countstar Automated Cell Counter.בהתבסס על העיקרון הקלאסי של ספירת תאים טריפאן כחולים, המכשירים של Countstar משלבים טכנולוגיית הדמיה אופטית מתקדמת, טכנולוגיית זיהוי תמונה חכמה ואלגוריתמי תוכנה רבי עוצמה כדי לספק לא רק את ריכוז התא והכדאיות, אלא גם לספק מידע על ריכוז התא, כדאיות, קצב צבירה, עגלגלות. , וחלוקת קוטר עם ריצה אחת בלבד.

ניתוח תא מצטבר

איור 3 איור 3 ספירה של תאים מצטברים.

א. תמונה של מדגם תא;
ב. תמונה של דגימת תא עם סימן זיהוי על ידי תוכנת Countstar BioTech.(מעגל ירוק: תא חי, מעגל צהוב: תא מת, מעגל אדום: תא מצטבר).
ג. היסטוגרמה מצטברת

כמה תאים ראשוניים או תאי תת-תרבות נוטים להצטבר כאשר מצב תרבות לקוי או עיכול מוגזם, ובכך גורמים לקושי רב בספירת התאים.עם פונקציית כיול הצבירה, Countstar יכול לממש חישוב גירוי של צבירה כדי להבטיח ספירת תאים מדויקת ולקבל את קצב הצבירה והיסטוגרמת הצבירה, ובכך לספק בסיס לנסיינים לשפוט את מצב התאים.

ניטור גידול תאים

איור 4 עקומת גידול תאים.

עקומת גדילת תאים היא שיטה נפוצה למדידת הצמיחה המוחלטת של מספר התאים, אינדיקטור חשוב לקביעת ריכוז התאים ואחד הפרמטרים הבסיסיים להתרבות התכונות הביולוגיות הבסיסיות של התאים.על מנת לתאר במדויק את השינוי הדינמי במספר התאים לאורך כל התהליך, ניתן לחלק את עקומת הגדילה האופיינית ל-4 חלקים: תקופת דגירה עם צמיחה איטית;שלב צמיחה אקספוננציאלי עם שיפוע גדול, שלב מישור ותקופת ירידה.ניתן לקבל את עקומת צמיחת התאים על ידי ציור מספר התאים החיים (10'000/mL) כנגד זמן התרבות (h או d).

מדידת ריכוז תאים וכדאיות

איור 1 התמונות נלכדו על ידי Countstar BioTech כאשר תאים (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 ו-MDCK) בהשעיה נצבעו על ידי Trypan Blue בהתאמה.

Countstar ישים לתאים בקוטר בין 5-180um, כמו תא יונקים, תא חרקים וכמה פלנקטונים.

מדידת גודל תא

איור 2 איור 2. מדידת גודל תא של תאי CHO לפני ואחרי טרנספקציית הפלסמיד.

א. תמונות של השעיה תאי CHO שנצבעו על ידי טריפן כחול לפני ואחרי טרנספקציית הפלסמיד.
ב. השוואה של היסטוגרמה בגודל תא CHO לפני ואחרי טרנספקציית הפלסמיד.

השינוי בגודל התא הוא מאפיין מפתח ונמדד בדרך כלל במחקר תאים.בדרך כלל זה יימדד בניסויים אלה: העברת תאים, בדיקת תרופות ומבחנים להפעלת תאים.Countstar מספק נתוני מורפולוגיה סטטיסטיים, כגון גדלים של תאים, תוך 20 שניות.

מונה תאים אוטומטי Countstar יכול לתת את הנתונים המורפולוגיים של תאים, כולל היסטוגרמות מעגליות וקוטר.