AOPIデュアル蛍光カウントは、細胞濃度と生存率を検出するために使用されるアッセイタイプです。溶液は、アクリジンオレンジ（緑色蛍光核酸染色）とヨウ化プロピジウム（赤色蛍光核酸染色）の組み合わせです。ヨウ化プロピジウム（PI）は、膜が損傷した細胞にのみ入る膜排除色素ですが、アクリジンオレンジは集団内のすべての細胞に浸透することができます。両方の色素が核内に存在する場合、ヨウ化プロピジウムは、蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）によってアクリジンオレンジの蛍光を減少させます。その結果、無傷の膜を持つ有核細胞は蛍光緑色に染色され、生細胞としてカウントされますが、膜が損傷した有核細胞は蛍光赤色のみに染色され、 システムを使用すると死んだものとしてカウントされます。赤血球、血小板、破片などの非核物質は蛍光を発せず、 ソフトウェアによって無視されます。
幹細胞治療のプロセス
図4細胞治療で使用するための間葉系幹細胞（MSC）の生存率と細胞数のモニタリング。
AO/PIおよびトリパンブルーアッセイによるMSC生存率の決定
図2.A.AO/PIとトリパンブルーで染色されたMSCの画像。2.輸送前後のAO/PIとトリパンブルーの結果の比較。
細胞の屈折率が変化し、トリパンブルー染色はそれほど明白ではなく、輸送後の生存率を決定することは困難です。デュアルカラー蛍光は生および死んだ有核細胞の染色を可能にしますが、破片、血小板、および赤血球の存在下でも正確な生存率の結果を生成します。
