AOPI ორმაგი ფლუორესცის დათვლა არის ანალიზის ტიპი, რომელიც გამოიყენება უჯრედის კონცენტრაციისა და სიცოცხლისუნარიანობის გამოსავლენად.ხსნარი არის ფორთოხლის აკრიდინის (მწვანე-ფლუორესცენტული ნუკლეინის მჟავის ლაქა) და პროპიდიუმის იოდიდის (წითელ-ფლუორესცენტული ნუკლეინის მჟავას ლაქა) კომბინაცია.პროპიდიუმის იოდიდი (PI) არის მემბრანის გამომრიცხავი საღებავი, რომელიც ხვდება მხოლოდ დაზიანებული მემბრანის უჯრედებში, ხოლო აკრიდინის ფორთოხალს შეუძლია შეაღწიოს პოპულაციის ყველა უჯრედში.როდესაც ორივე საღებავი იმყოფება ბირთვში, პროპიდიუმის იოდიდი იწვევს აკრიდინის ფორთოხლის ფლუორესცენტის შემცირებას ფლუორესცენტული რეზონანსული ენერგიის გადაცემით (FRET).შედეგად, უცვლელი მემბრანების ბირთვიანი უჯრედები ღებულობენ ფლუორესცენტულ მწვანეს და ითვლება ცოცხალად, ხოლო ბირთვული უჯრედები დაზიანებული მემბრანებით მხოლოდ ფლუორესცენტულ წითლად შეღებავს და ითვლება მკვდრად Countstar® FL სისტემის გამოყენებისას.არაბირთვიანი მასალა, როგორიცაა სისხლის წითელი უჯრედები, თრომბოციტები და ნამსხვრევები, არ ფლუორესცირდება და იგნორირებულია Countstar® FL პროგრამული უზრუნველყოფის მიერ.
ღეროვანი უჯრედებით თერაპიის პროცესი
სურათი 4 მეზენქიმული ღეროვანი უჯრედების (MSCs) სიცოცხლისუნარიანობის და უჯრედების რაოდენობის მონიტორინგი უჯრედულ თერაპიაში გამოსაყენებლად.
განსაზღვრეთ MSC სიცოცხლისუნარიანობა AO/PI და Trypan Blue ანალიზით
სურათი 2. A. MSC-ის სურათი შეღებილი AO/PI და ტრიპანი ლურჯით;2. AO/PI და Trypan blue შედეგის შედარება ტრანსპორტირებამდე და მის შემდეგ.
იცვლება უჯრედის რეფრაქციული ინდექსი, ტრიპანის ლურჯი შეღებვა არც ისე აშკარა იყო, ტრანსპორტირების შემდეგ ძნელია სიცოცხლისუნარიანობის დადგენა.მიუხედავად იმისა, რომ ორმაგი ფერის ფლუორესცენცია იძლევა ცოცხალი და მკვდარი ბირთვული უჯრედების შეღებვას, ზუსტი სიცოცხლისუნარიანობის წარმოქმნას ნამსხვრევების, თრომბოციტების და სისხლის წითელი უჯრედების არსებობის შემთხვევაშიც კი.
