ექსპერიმენტული პროტოკოლი
ციტოტოქსიკურობის % გამოითვლება ქვემოთ მოცემული განტოლებით.
ციტოტოქსიურობა % = (კონტროლის ცოცხალი რაოდენობა – დამუშავებული ადამიანების ცოცხალი რაოდენობა) / კონტროლის ცოცხალი რაოდენობა × 100
სამიზნე სიმსივნური უჯრედების მარკირებით არატოქსიკური, არარადიოაქტიური კალცეინით AM ან ტრანსფექტით GFP-ით, ჩვენ შეგვიძლია დავაკვირდეთ სიმსივნური უჯრედების მკვლელობას CAR-T უჯრედების მიერ.მიუხედავად იმისა, რომ ცოცხალი სამიზნე კიბოს უჯრედები იქნება მარკირებული მწვანე კალცეინის AM ან GFP-ით, მკვდარი უჯრედები ვერ შეინარჩუნებენ მწვანე საღებავს.Hoechst 33342 გამოიყენება ყველა უჯრედის შეღებვისთვის (როგორც T უჯრედები, ასევე სიმსივნური უჯრედები), ალტერნატიულად, სამიზნე სიმსივნური უჯრედები შეიძლება შეიღებოს მემბრანასთან დაკავშირებული კალცეინ AM-ით, PI გამოიყენება მკვდარი უჯრედების შეღებვისთვის (როგორც T უჯრედები, ასევე სიმსივნური უჯრედები).შეღებვის ეს სტრატეგია სხვადასხვა უჯრედების გარჩევის საშუალებას იძლევა.
E: T K562-ის ციტოტოქსიკურობა დამოკიდებულია თანაფარდობაზე
მაგალითი Hoechst 33342, CFSE, PI ფლუორესცენტური გამოსახულებები არის K562 სამიზნე უჯრედები t = 3 საათში
მიღებულმა ფლუორესცენტურმა სურათებმა აჩვენა Hoechst+CFSE+PI+ სამიზნე უჯრედების ზრდა E:T თანაფარდობის გაზრდით
