Суспензиядағы жасушалары бар үлгі трипан көк бояуымен араласады, содан кейін Countstar автоматтандырылған ұяшықтар есептегішімен талданған Countstar камерасының слайдына тартылады.Классикалық трипан-көк жасушаларды санау принципіне негізделген Countstar құралдары озық оптикалық бейнелеу технологиясын, кескінді интеллектуалды тану технологиясын және қуатты бағдарламалық қамтамасыз ету алгоритмдерін біріктіріп қана қоймай, жасуша концентрациясы мен өміршеңдігін қамтамасыз етіп қана қоймайды, сонымен қатар жасуша концентрациясы, өміршеңдігі, агрегация жылдамдығы, дөңгелектігі туралы ақпарат береді. , және тек бір жүгіріспен диаметрді бөлу.
Агрегацияланған жасуша талдауы
3-сурет Біріктірілген ұяшықтарды санау.
A. Жасуша үлгісінің суреті;
B. Countstar BioTech бағдарламалық құралының сәйкестендіру белгісі бар жасуша үлгісінің суреті.(Жасыл шеңбер: тірі ұяшық, сары шеңбер: өлі жасуша, қызыл шеңбер: жинақталған ұяшық).
C. Жиынтық гистограмма
Кейбір бастапқы жасушалар немесе субкультура жасушалары нашар культура күйінде немесе шамадан тыс ас қорыту кезінде біріктіруге бейім, осылайша жасушаларды санауда үлкен қиындықтар тудырады.Агрегацияны калибрлеу функциясы арқылы Countstar ұяшықтарды дәл санауды қамтамасыз ету және жинақтау жылдамдығы мен агрегация гистограммасын алу үшін жинақтауларды ынталандыру есебін жүзеге асыра алады, осылайша экспериментаторларға жасушалардың күйін бағалауға негіз болады.
Жасушаның өсуін бақылау
4-сурет Жасуша өсу қисығы.
Жасуша өсу қисығы – жасуша санының абсолютті өсуін өлшеудің кең тараған әдісі, жасуша концентрациясын анықтаудың маңызды көрсеткіші және жасушалардың негізгі биологиялық қасиеттерін өсірудің негізгі параметрлерінің бірі.Бүкіл процесс барысында жасушалар санының динамикалық өзгеруін дәл сипаттау үшін типтік өсу қисығын 4 бөлікке бөлуге болады: өсу баяу инкубациялық кезең;үлкен көлбеу, плато фазасы және құлдырау кезеңі бар экспоненциалды өсу фазасы.Жасушаның өсу қисығын тірі жасушалардың санын (10'000/мл) өсіру уақытына (сағ немесе d) қарсы қою арқылы алуға болады.
Жасуша концентрациясын және өміршеңдігін өлшеу
1-сурет Суреттер Countstar BioTech арқылы түсірілген, суспензиядағы жасушалар (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 және MDCK) сәйкесінше Trypan Blue арқылы боялған.
Countstar диаметрі 5-180 мм аралығындағы жасушаларға қолданылады, мысалы, сүтқоректілер жасушасы, жәндіктер жасушасы және кейбір планктондар.
Ұяшық өлшемін өлшеу
2-сурет. Плазмидті трансфекцияға дейін және кейін CHO жасушаларының жасуша өлшемін өлшеу.
A. Плазмидті трансфекцияға дейін және кейін трипан көкпен боялған CHO жасушаларының суспензиясының суреттері.
B. Плазмидті трансфекцияға дейінгі және кейінгі CHO жасушаларының гистограммасын салыстыру.
Жасуша мөлшерінің өзгеруі негізгі қасиет болып табылады және әдетте жасушалық зерттеулерде өлшенеді.Әдетте бұл эксперименттерде өлшенеді: жасуша трансфекциясы, есірткі сынағы және жасушаны белсендіру талдаулары.Countstar ұяшықтардың өлшемдері сияқты статистикалық морфология деректерін 20 секунд ішінде береді.
Countstar автоматтандырылған ұяшықтар есептегіші шеңберлік және диаметрлі гистограммаларды қоса алғанда, жасушалардың морфологиялық деректерін бере алады.
