Қос флуоресценцияның өміршеңдігі (AO/PI), акридин қызғылт сары (AO) және пропидий йодид (PI) - ядролық нуклеинді бояйтын және қышқылмен байланыстыратын бояғыштар.AO өлі және тірі жасушалардың мембранасынан өтіп, жасыл флуоресценция тудыратын ядроны бояй алады.Керісінше, PI тек қызыл флуоресценцияны тудыратын өлі ядролы жасушалардың ыдырайтын мембраналарын ғана өткізе алады.Countstar Rigel кескінге негізделген технологиясы жасуша фрагменттерін, қоқыстарды және артефакт бөлшектерін, сондай-ақ тромбоциттер сияқты кішігірім оқиғаларды болдырмайды, бұл өте дәл нәтиже береді.Қорытындылай келе, Countstar Rigel жүйесін ұяшықты өндіру процесінің әрбір сатысында қолдануға болады.

T/NK жасушалық цитоуыттылық. Жақында FDA мақұлдаған CAR-T жасушалық терапиясында гендік-инженерлік Т-лимфоциттер мақсатты ісік жасушаларымен (T) арнайы байланысады және оларды өлтіреді.Countstar Rigel анализаторлары T/NK жасушалық цитоуыттылықтың осы толық процесін талдай алады.

Цитоуыттылық зерттеулері мақсатты ісік жасушаларын CFSE арқылы таңбалау немесе оларды GFP арқылы трансфекциялау арқылы орындалады.Hoechst 33342 барлық жасушаларды (Т жасушаларын да, ісік жасушаларын да) бояу үшін қолданылуы мүмкін.Немесе мақсатты ісік жасушаларын CFSE бояуымен бояуға болады.Пропидий йодид (PI) өлі жасушаларды (Т-клеткаларды да, ісік жасушаларын да) бояу үшін қолданылады.Осы бояу стратегиясы арқылы әртүрлі жасушалар арасындағы дискриминацияны алуға болады.

GFP трансфекциясының тиімділігі, молекулярлық генетикада, әртүрлі модельдік организмдерде және жасуша биологиясында GFP гені экспрессиялық зерттеулер үшін репортер ретінде жиі пайдаланылады.Қазіргі уақытта ғалымдар сүтқоректілердің жасушаларының трансфекция тиімділігін талдау үшін әдетте флуоресцентті микроскоптарды немесе ағын цитометрлерін пайдаланады.Бірақ озық ағын цитометрінің күрделі технологиясын өңдеу тәжірибелі және жоғары білікті операторды талап етеді.Countstar Rigel пайдаланушыларға дәстүрлі ағынды цитометриямен байланысты операциялық және техникалық қызмет көрсету шығындарынсыз трансфекция тиімділігі талдауын оңай және дәл орындауға мүмкіндік береді.

Жасуша апоптозы, жасуша апоптозының барысын FITC конъюгацияланған Annexin-V көмегімен 7-ADD біріктіріп бақылауға болады.Фосфатидилсерин (ФС) қалдықтары әдетте сау жасушалардың плазмалық мембранасының ішкі жағында орналасады.Ерте апоптоз кезінде мембрананың тұтастығы жоғалады және PS жасуша мембранасының сыртына ауыстырылады.Анексин V PS-ге күшті жақындыққа ие және сондықтан ерте апоптозды жасушалар үшін тамаша маркер болып табылады.

Жасуша циклі, жасушаның бөлінуі кезінде жасушаларда ДНҚ мөлшері жоғарылайды.PI белгісімен флуоресценция қарқындылығының жоғарылауы ДНҚ жинақталуына тура пропорционал.Жалғыз жасушалардың флуоресценция қарқындылығындағы айырмашылықтар жасушалық циклдің нақты күйінің көрсеткіштері болып табылады MCF 7 жасушалары осы жасушаларды жасушалық циклінің әртүрлі кезеңдерінде ұстау үшін 4мкМ Нокодазолмен өңделген.Осы сынақ сценарийі кезінде алынған жарқын өріс кескіндері әрбір ұяшықты анықтауға мүмкіндік береді.Countstar Rigel-дің PI флуоресценциялық арнасы бір жасушалардың ДНҚ сигналдарын агрегаттарда да анықтайды.Флуоресценция қарқындылығын егжей-тегжейлі талдау FCS көмегімен жүзеге асырылуы мүмкін.

CD Marker Phenotyping, Countstar Rigel модельдері жасушаларды иммундық негізде фенотиптеуді тиімдірек ету үшін жылдамырақ, қарапайым және сезімтал тәсілді ұсынады.Ажыратымдылығы жоғары кескіндер мен қуатты біріктірілген деректерді талдау мүмкіндіктерімен Countstar Rigel пайдаланушыларға кең күрделі басқару параметрлерін және флуоресценттік өтемақы реттеулерін қажет етпей-ақ тұрақты сенімді нәтижелерге қол жеткізуге мүмкіндік береді.

Cytokine Induced Killer (CIK) жасушаларының дифференциациясы Countstar Rigel анализаторының жоғары сыныпты ағынды цитометрлермен тікелей салыстырғанда тамаша өнімділік сапасын көрсетеді.Мәдениеттегі тінтуірдің PBMC-тері CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE және CD56-PE боялған және Интерлейкин (IL) 6 арқылы индукцияланған. Содан кейін Countstar® Rigel және Flow Cytometry көмегімен бір уақытта талданған.Бұл сынақта CD3-CD4, CD3-CD8 және CD3-CD56 әртүрлі жасуша субпопуляцияларының үлесін анықтау үшін үш топқа бөлінді.

Жасуша сызықтарын шығаратын иммунофлуоресценция, моноклоналды антиденелер деградацияға немесе генетикалық мутацияға байланысты жасуша пролиферациясы және өту кезінде кейбір оң клондарды жоғалтады.Жоғары жоғалту өндірістік процестің өнімділігіне айтарлықтай әсер етеді.Деградацияның мониторингі антиденелердің шығуын оңтайлы деңгейге ауыстыру үшін процесті бақылауда маңызды рөл атқарады.

BioPharma өнеркәсібінде өндірілген антиденелердің көпшілігін иммунофлуоресценциялық таңбалау арқылы анықтауға және Countstar Rigel сериясы бойынша сандық талдауға болады.Төмендегі жарық өрісі мен флуоресцентті арна кескіндері қажетті антиденелерді шығару үшін атрибуттарын жоғалтқан клондарды анық көрсетеді.DeNovo FCS Express Image бағдарламалық құралының көмегімен егжей-тегжейлі талдау барлық жасушалардың 86,35% иммуноглобулиндерді экспрессиялайтынын растайды, тек 3,34% анық теріс.

Трипан (көк түспен B әрпін бас әріппен жазу) Жасушаларды санау, трипан көк бояуы әлі де жасуша мәдениеті зертханаларының көпшілігінде қолданылады.

Trypan Blue Viability және Cell Density BioApp қолданбасын барлық Countstar Rigel үлгілеріне орнатуға болады.Біздің қорғалған кескінді тану алгоритмдері анықталған әрбір объектіні жіктеу үшін 20-дан астам параметрді талдайды.

Cell Line Storage QC, ұяшықтарды сақтауда сапаны басқарудың күрделі тұжырымдамасы барлық ұялы өнімдердің қауіпсіз, тиімді мониторингін қамтамасыз етеді.Бұл эксперименттер, процесті дамыту және өндіру үшін криоконсервіленген, криоконсервіленген жасушаның тұрақты сапасына кепілдік береді.

Countstar Rigel ұялы объектілердің диаметрі, пішіні және агрегация үрдісі сияқты әртүрлі морфологиялық сипаттамаларын талдай отырып, жоғары ажыратымдылықтағы кескіндерді алады.Әртүрлі процесс қадамдарының суреттерін бір-бірімен оңай салыстыруға болады.Осылайша, адамның субъективті өлшемдерін болдырмау арқылы пішіндегі және агрегациядағы вариацияларды оңай анықтауға болады.Ал Countstar Rigel деректер базасында кескіндер мен деректерді сақтау және іздеу үшін күрделі басқару жүйесі бар.