ಕಾದಂಬರಿ ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸೈಟೋಮೆಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕಾಂಡಕೋಶದ ನೇರ ಏಕಾಗ್ರತೆ, ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆ ಮತ್ತು ಫಿನೋಟೈಪ್ ಮಾಪನ

ಅಮೂರ್ತ: ಮೆಸೆಂಚೈಮಲ್ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳು ಪ್ಲುರಿಪೊಟೆಂಟ್ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳ ಉಪವಿಭಾಗವಾಗಿದ್ದು, ಇದನ್ನು ಮೆಸೋಡರ್ಮ್ನಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಬಹುದು.ಅವರ ಸ್ವಯಂ ಪುನರಾವರ್ತನೆಯ ನವೀಕರಣ ಮತ್ತು ಬಹು-ದಿಕ್ಕಿನ ವಿಭಿನ್ನ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳೊಂದಿಗೆ, ಅವರು ವೈದ್ಯಕೀಯದಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದಾರೆ.ಮೆಸೆಂಚೈಮಲ್ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಫಿನೋಟೈಪ್ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ನಿಯಂತ್ರಣ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ.ಆದ್ದರಿಂದ, ಮೆಸೆಂಕಿಮಲ್ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳನ್ನು ಈಗಾಗಲೇ ಕಾಂಡಕೋಶ ಕಸಿ, ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಅಂಗ ಕಸಿಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಮತ್ತು ಈ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳ ಹೊರತಾಗಿ, ಅಂಗಾಂಶ ಎಂಜಿನಿಯರಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ ಮೂಲ ಮತ್ತು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಸಂಶೋಧನಾ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಸರಣಿಯಲ್ಲಿ ಸೀಡರ್ ಕೋಶಗಳಾಗಿ ಅವುಗಳನ್ನು ಆದರ್ಶ ಸಾಧನವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ, ಮೆಸೆಂಚೈಮಲ್ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳ ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಅಂಗೀಕರಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ವಿಧಾನ ಮತ್ತು ಮಾನದಂಡವಿಲ್ಲ.ಕೌಂಟ್ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ಈ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ವ್ಯತ್ಯಾಸದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಏಕಾಗ್ರತೆ, ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆ ಮತ್ತು ಫಿನೋಟೈಪ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು (ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಬದಲಾವಣೆಗಳು) ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಬಹುದು.ಕೋಶದ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆಯ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಶಾಶ್ವತ ಬ್ರೈಟ್‌ಫೀಲ್ಡ್ ಮತ್ತು ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್-ಆಧಾರಿತ ಇಮೇಜ್ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್‌ಗಳಿಂದ ಒದಗಿಸಲಾದ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಪಡೆಯುವಲ್ಲಿ ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ಪ್ರಯೋಜನವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.Countstar Rigel ಕಾಂಡಕೋಶಗಳ ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕಾಗಿ ವೇಗವಾದ, ಅತ್ಯಾಧುನಿಕ ಮತ್ತು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ವಿಧಾನವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.

ವಸ್ತುಗಳು ಮತ್ತು ವಿಧಾನಗಳು:
ಅಡಿಪೋಸ್-ಡೆರೈವ್ಡ್ ಮೆಸೆಂಚೈಮಲ್ ಸ್ಟೆಮ್ ಸೆಲ್‌ಗಳನ್ನು (AdMSCs) ಪ್ರೊಫೆಸರ್ ನಿಯಾನ್‌ಮಿನ್ ಕಿ, AO/PI ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ ಸೊಲ್ಯೂಶನ್ (ಶಾಂಘೈ ರುಯಿಯು, CF002) ಅವರು ಉಡುಗೊರೆಯಾಗಿ ನೀಡಿದ್ದಾರೆ.ಪ್ರತಿಕಾಯ: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (BD ಕಂಪನಿ).
AdMSC ಗಳನ್ನು 37℃, 5% CO2 ತೇವಾಂಶವುಳ್ಳ ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಲಾಗಿದೆ.ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ.
ಸಿಡಿ ಮಾರ್ಕರ್ ಕಲೆ ಹಾಕುವ ವಿಧಾನವನ್ನು ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಕೈಪಿಡಿಯಾಗಿ ಅನುಸರಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಿಡಿ ಮಾರ್ಕರ್ ಪತ್ತೆ:
1. PE ಚಾನಲ್ ಅನ್ನು ಇಮೇಜ್ PE ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್‌ಗೆ ಹೊಂದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಿಗ್ನಲ್-ಕಲರ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ.
2. ಪ್ರತಿ ಚೇಂಬರ್‌ನಿಂದ 3 ಕ್ಷೇತ್ರಗಳನ್ನು ವಶಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ.
3. ಚಿತ್ರಣ ಮತ್ತು ಆರಂಭಿಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡ ನಂತರ, ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ವರ್ಗಾವಣೆಗಾಗಿ ಮಿತಿ (ಲಾಗ್ ಗೇಟ್) ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್ ಅನ್ನು FCS ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಹೊಂದಿಸಿದೆ.

ಕಾಂಡಕೋಶದ ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ
ಕೆಳಗಿನ ಚಿತ್ರ (ಚಿತ್ರ 1) ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ ಕಾಂಡಕೋಶ ಚಿಕಿತ್ಸೆ .

ಚಿತ್ರ 1: ಕಾಂಡಕೋಶ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ವಿಧಾನ

ಫಲಿತಾಂಶಗಳು:
AdMSC ಗಳ ಏಕಾಗ್ರತೆ, ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆ, ವ್ಯಾಸ ಮತ್ತು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವುದು.
AdMSC ಗಳ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು AO/PI ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ, ಹಸಿರು ಚಾನಲ್ ಮತ್ತು ಕೆಂಪು ಚಾನಲ್ ಅನ್ನು ಇಮೇಜ್ AO ಮತ್ತು PI ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್‌ಗೆ ಹೊಂದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಡ್ಯುಯಲ್-ಕಲರ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ, ಜೊತೆಗೆ ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ ಕ್ಷೇತ್ರವಾಗಿದೆ.ಉದಾಹರಣೆ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಚಿತ್ರ 2. AdMSC ಗಳ ಸಾಗಣೆಯ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ಸಾಗಣೆಯ ನಂತರದ ಚಿತ್ರಗಳು.ಎ. ಸಾಗಣೆಗೆ ಮೊದಲು;ಪ್ರತಿನಿಧಿ ಚಿತ್ರವನ್ನು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.B. ಸಾರಿಗೆ ನಂತರ;ಪ್ರತಿನಿಧಿ ಚಿತ್ರವನ್ನು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.

AdMSC ಗಳ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಸಾರಿಗೆಯ ಮೊದಲು ಸಾರಿಗೆಯೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದಾಗ ಸಾರಿಗೆ ನಂತರ ತೀವ್ರವಾಗಿ ಬದಲಾಗಿದೆ.ಸಾಗಣೆಗೆ ಮುಂಚಿನ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯು 92% ಆಗಿತ್ತು, ಆದರೆ ಸಾರಿಗೆಯ ನಂತರ ಇದು 71% ಕ್ಕೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ.ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಚಿತ್ರ 3 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಚಿತ್ರ 3. AdMSC ಗಳ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು (ಸಾರಿಗೆ ಮೊದಲು ಮತ್ತು ಸಾರಿಗೆ ನಂತರ)

ವ್ಯಾಸ ಮತ್ತು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ನಿರ್ಧರಿಸಿದ್ದಾರೆ.AdMSC ಗಳ ವ್ಯಾಸವು ಸಾಗಣೆಯ ನಂತರ ಸಾಗಣೆಗೆ ಮೊದಲು ಹೋಲಿಸಿದರೆ ತೀವ್ರವಾಗಿ ಬದಲಾಗಿದೆ.ಸಾಗಣೆಗೆ ಮುಂಚಿನ ವ್ಯಾಸವು 19µm ಆಗಿತ್ತು, ಆದರೆ ಸಾಗಣೆಯ ನಂತರ ಇದು 21µm ಗೆ ಹೆಚ್ಚಾಯಿತು.ಸಾಗಣೆಗೆ ಮುಂಚಿನ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವಿಕೆಯು 20% ರಷ್ಟಿತ್ತು, ಆದರೆ ಸಾರಿಗೆಯ ನಂತರ ಇದು 25% ಕ್ಕೆ ಏರಿತು.ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ಸೆರೆಹಿಡಿದ ಚಿತ್ರಗಳಿಂದ, ಸಾಗಣೆಯ ನಂತರ AdMSC ಗಳ ಫಿನೋಟೈಪ್ ಅನ್ನು ತೀವ್ರವಾಗಿ ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗಿದೆ.ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 4 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಚಿತ್ರ 4: ವ್ಯಾಸ ಮತ್ತು ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವಿಕೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು.ಎ: AdMSC ಗಳ ಪ್ರಾತಿನಿಧಿಕ ಚಿತ್ರಗಳು, AdMSC ಗಳ ಫಿನೋಟೈಪ್ ಸಾಗಣೆಯ ನಂತರ ತೀವ್ರವಾಗಿ ಬದಲಾಗಿದೆ.ಬಿ: ಸಾಗಣೆಗೆ ಮುಂಚಿನ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವಿಕೆಯು 20% ಆಗಿತ್ತು, ಆದರೆ ಸಾರಿಗೆ ನಂತರ ಇದು 25% ಕ್ಕೆ ಏರಿತು.ಸಿ: ಸಾಗಣೆಗೆ ಮುಂಚಿನ ವ್ಯಾಸವು 19µm ಆಗಿತ್ತು, ಆದರೆ ಸಾರಿಗೆ ನಂತರ ಇದು 21µm ಗೆ ಹೆಚ್ಚಾಯಿತು.

ಕೌಂಟ್ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ನಿಂದ AdMSC ಗಳ ಇಮ್ಯುನೊಫೆನೋಟೈಪ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಿ
AdMSC ಗಳ ಇಮ್ಯುನೊಫೆನೋಟೈಪ್ ಅನ್ನು ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ನಿರ್ಧರಿಸಿದ್ದಾರೆ, AdMSC ಗಳನ್ನು ಕ್ರಮವಾಗಿ ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).ಹಸಿರು ಚಾನೆಲ್ ಅನ್ನು ಇಮೇಜ್ PE ಪ್ರತಿದೀಪಕಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಿಗ್ನಲ್-ಕಲರ್ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ, ಜೊತೆಗೆ ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ ಕ್ಷೇತ್ರ.PE ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಅನ್ನು ಮಾದರಿ ಮಾಡಲು ಬ್ರೈಟ್ ಫೀಲ್ಡ್ ಪಿಕ್ಚರ್ ರೆಫರೆನ್ಸ್ ಸೆಗ್ಮೆಂಟೇಶನ್ ಅನ್ನು ಮುಖವಾಡವಾಗಿ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿದೆ.CD105 ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 5).

ಚಿತ್ರ 5: AdMSC ಗಳ CD105 ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ನಿರ್ಧರಿಸಿದ್ದಾರೆ.A: FCS ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ 5 ಪ್ಲಸ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್‌ನಿಂದ ವಿಭಿನ್ನ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ CD105 ನ ಧನಾತ್ಮಕ ಶೇಕಡಾವಾರು ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ.ಬಿ: ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ ಚಿತ್ರಗಳು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತವೆ.ಸಿ: ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಜೀವಕೋಶದ ಥಂಬ್‌ನೇಲ್‌ಗಳ ಮೂಲಕ ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು, FCS ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಪರಿಕರಗಳು ಕೋಶಗಳನ್ನು ಅವುಗಳ ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರೊಟೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ವಿವಿಧ ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಇತರ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಚಿತ್ರ 6 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ

ಚಿತ್ರ 6: A: ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಸ್ಪಿಂಡಲ್-ಆಕಾರದ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದೊಂದಿಗೆ ASC ಗಳ ಪ್ರತಿನಿಧಿ ಚಿತ್ರ.ಒಲಿಂಪಸ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಿಂದ ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲಾಗಿದೆ.ಮೂಲ ವರ್ಧನೆ, (10x).B: ASC ಗಳ ಅಡಿಪೋಜೆನಿಕ್ ವ್ಯತ್ಯಾಸವು ಖನಿಜೀಕರಣದ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುವ ರುಥೇನಿಯಮ್ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದಿಂದ ಸಾಕ್ಷಿಯಾಗಿದೆ.ಒಲಿಂಪಸ್ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದಿಂದ ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲಾಗಿದೆ.ಮೂಲ ವರ್ಧನೆ (10x).C: ASC ಗಳ Countstar FL ಗುಣಲಕ್ಷಣ.

ಸಾರಾಂಶ:
ಈ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ವ್ಯತ್ಯಾಸದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ FL ಏಕಾಗ್ರತೆ, ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆ ಮತ್ತು ಫಿನೋಟೈಪ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು (ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಬದಲಾವಣೆಗಳು) ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಬಹುದು.ಎಫ್‌ಸಿಎಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಪ್ರತಿ ಸಿಗ್ನಲ್ ಸೆಲ್ ಅನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸುವ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಪೂರೈಸುತ್ತದೆ, ಚಿತ್ರದ ಮೂಲಕ ಡೇಟಾವನ್ನು ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸುತ್ತದೆ.ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಮುಂದಿನ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಕೈಗೊಳ್ಳಲು ಬಳಕೆದಾರರು ವಿಶ್ವಾಸ ಹೊಂದಬಹುದು.Countstar Rigel ಕಾಂಡಕೋಶಗಳ ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕಾಗಿ ವೇಗವಾದ, ಅತ್ಯಾಧುನಿಕ ಮತ್ತು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ವಿಧಾನವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.